【摘 要】
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目的克隆产气荚膜梭菌β毒素基因，并选择可能影响其生物活性的氨基酸的相关碱基位点进行定点突变，构建β毒素基因的突变体。方法利用PCR从C型产气荚膜梭菌基因组DNA中，扩增出约0
【机 构】
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宁夏大学生物技术重点实验室银川750021,中国兽药监察所北京100081
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目的克隆产气荚膜梭菌β毒素基因，并选择可能影响其生物活性的氨基酸的相关碱基位点进行定点突变，构建β毒素基因的突变体。方法利用PCR从C型产气荚膜梭菌基因组DNA中，扩增出约0．7kb的基因，将其克隆至pGEM-T载体上。经COLDKEY软件分析抗原表位，PCR定点突变技术进行234位半胱氨酸一苷氨酸的定点突变。结果β毒素基因核苷酸序列与报道的一致，其突变基因699位核苷酸由T→G。结论已成功克隆了β毒素基因，并准确实施了预期定点突变。
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