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目的：构建真核细胞pCMV／nue／M—CSF载体，建立M—CSF核内稳定表达细胞系，为进一步研究M—CSF的核内作用奠定基础。方法：采用PCR扩增人M—CSF活性片段，将M—CSF片段插入真核表达载体pCMV／myc／nuc，强制性把M—CSF引入细胞核内，通过PCR、测序鉴定筛选阳性重组体pCMV／M—CSF，脂质体介导转染HeLa细胞，经G418筛选后，用RT—PCR、间接免疫荧光鉴定其在HeLa细胞中的表达及定位分布。结果：琼脂糖电泳结果显示插入片段为1400bp左右，与预期M—CSF分子大小相当