【摘 要】
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脊尾白虾(Palaemon carincauda)隶属于甲壳纲、十足目、白虾属.脊尾白虾在精子形成过程中没有鞭毛的形成,但是伴有核形变、片层复合体(LCx)的形成、顶体的发生等形态结构变化.KIF3A/3B是沿着微管从负极到正极定向运动的N-末端驱动蛋白,二者与KAP3形成稳定的异源三聚体,在精子形成过程中发挥重要作用.研究表明在有尾类精子形成过程中,KIF3A/3B主要参与线粒体迁移和尾部的形成
【机 构】
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宁波大学海洋学院,宁波315211
【出 处】
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第十届世界华人虾蟹养殖研讨会暨2016年中国河蟹产业发展高峰论坛
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脊尾白虾(Palaemon carincauda)隶属于甲壳纲、十足目、白虾属.脊尾白虾在精子形成过程中没有鞭毛的形成,但是伴有核形变、片层复合体(LCx)的形成、顶体的发生等形态结构变化.KIF3A/3B是沿着微管从负极到正极定向运动的N-末端驱动蛋白,二者与KAP3形成稳定的异源三聚体,在精子形成过程中发挥重要作用.研究表明在有尾类精子形成过程中,KIF3A/3B主要参与线粒体迁移和尾部的形成.而其在无尾类精子形成过程中的功能尚不明确.我们通过PCR及RACE技术从脊尾白虾的精巢中获得了kif3a/3b基因,用荧光定量PCR、原位杂交、免疫荧光技术研究了KIF3A/3B在精子形成过程中的表达模式.结果 表明,脊尾白虾kif3a基因cDNA序列全长为2745bp,包括5-UTR 157bp、3-UTR 584bp、 ORF 2004bp,编码667个氨基酸；kif3b基因cDNA序列全长为2732bp,包括5-UTR 164bp、3-UTR 411 bp、ORF 2157bp,编码718个氨基酸.同源序列比对结果显示,脊尾白虾的KIF3A和KIF3B与中华绒螯蟹相似性最高,分别为87.4％和71.7％.进化树分析结果显示,脊尾白虾与中华绒螯蟹亲缘关系最近.定量PCR分析显示,kif3a/3b基因在被检测的所有组织中均有表达,精巢中表达量较高.原位杂交分析表明,在精子形成过程中,kif3a/3b mRNA动态表达模式基本一致：早期精细胞,Mf3a/3bmRNA表达量较低,mRNA信号主要分布在核周；中期精细胞,kif3a/3b mRNA表达量明显增强,信号主要分布在核的一端；后期精细胞,kif3a/3b mRNA信号主要分布在顶体帽及原顶体；成熟精子,kif3a/3b mRNA信号明显减弱,而且mRNA信号主要集中在顶体.免疫荧光分析结果显示,KIF3A蛋白信号与微管蛋白信号共定位,而且KIF3A蛋白信号与线粒体以及高尔基体标记物也存在共定位现象.早期精细胞：KIF3A表达量较低,蛋白信号主要分布在核周；中期精细胞：KIF3A主要分布在核的一端；后期精细胞：KIF3A蛋白信号主要分布在原顶体；成熟精子：KIF3A信号明显减弱,信号主要集中在顶体.以上结果初步表明,KIF3A/3B可能在脊尾白虾精子发生过程中参与细胞器的迁移及精子顶体的形成.
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