【摘 要】
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本研究通过联合使用组成型启动子和共表达伴侣因子、转录因子,提升了截短κ-卡拉胶酶基因(cgkZΔPst)在毕赤酵母中的表达水平.3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAP)启动子可使重组κ-
【机 构】
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中国海洋大学食品科学与工程学院 山东青岛 266003
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本研究通过联合使用组成型启动子和共表达伴侣因子、转录因子,提升了截短κ-卡拉胶酶基因(cgkZΔPst)在毕赤酵母中的表达水平.3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAP)启动子可使重组κ-卡拉胶酶在不添加甲醇诱导的条件下得到表达.经过22℃的96 小时摇瓶培养,产酶活力为2.73 U/mL.甲醇添加量为1％(v/v)时,重组酶酶活力达7.96 U/mL,为对照组的1.4 倍.共表达一系列可促进外源蛋白折叠,避免蛋白聚集和抵抗氧化应激的伴侣因子与转录因子,目的基因cgkZΔPst 的转录水平提高至对照菌株的1.3-1.9 倍,重组酶cgkZΔPst 的酶活力提高到7.0-7.7 U/mL.诱导型AOX1 启动子与组成型GAP 启动子的联合使用明显提升了重组κ-卡拉胶酶的表达量；共表达合适的转录因子与伴侣因子同样可促进重组κ-卡拉胶酶的分泌表达.这项研究有望为其他海洋多糖水解酶的深入开发提供思路.
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