论文部分内容阅读
目的:研究miR-181a对巨噬细胞表型转化的调控作用及分子机制.方法:利用PMA诱导人白血病单核细胞系THP-1成为静息态巨噬细胞(H-MΦ),培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,分离小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM),然后加入LPS和IFN-γ诱导为M1型巨噬细胞,加入IL-4诱导为M2型巨噬细胞;通过流式细胞仪和免疫荧光技术检测特异性表面标记物CD86、CD206在不同类型巨噬细胞中表达;应用Real-time PCR和Western blot方法检测不同表型巨噬细胞中M1型和M2型特异性标志物IL-1β、CD163等mRNA及蛋白表达水平;采用ELISA方法检测细胞培养基中分泌因子的含量;荧光素酶报告基因技术分析miR-181a对靶基因的靶向抑制作用;通过Transwell法检测肿瘤细胞的侵袭和迁移能力.