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目的 观察幼年感染内毒素对大鼠成年后实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)神经功能损伤和中枢病理改变的影响,并通过观察这些大鼠中枢神经系统(CNS)内胶质细胞的变化以及细胞因子的改变,探讨幼年感染细菌内毒素影响大鼠成年后EAE发病可能的免疫调节机制.方法 分别给与出生后第3天和第5天的同窝Sprague-Dawley (SD)幼鼠腹腔注射LPS (0.01mg/ml) 0.05ml或同等剂量无菌生理盐水,成年后(出生后第8周)再用豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)免疫这两组大鼠制作EAE模型,比较这两组大鼠的行为学、组织病理学和脱髓鞘变化；并采用免疫组织化学法检测CNS内各部位小胶质细胞和星形胶质细胞的变化,分别以离子钙结合受体分子1 (Iba-1)抗体和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体标记.同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测剩余两组各半数大鼠CNS内各部位白介素-17 (IL-17)、干扰素-γ (IFN-γ)和白介素-10 (IL-10)的蛋白表达水平.结果 (1)行为学观察：LPS处理组大鼠EAE发病率7/24,与生理盐水组(18/20)相比明显降低(P＜0.01).从病情严重度来看,免疫后LPS处理组大鼠EAE症状评分比生理盐水组低,组间差异有统计学意义(P＜0.01),LPS处理组大鼠EAE最大症状评分(0.65±0.24)与生理盐水组(2.25±0.27)相比也明显下降(P＜0.01).但两组大鼠发病潜伏期相比无统计学意义(P＞0.05). (2)组织病理学改变：LPS处理组与生理盐水组相比CNS内炎症细胞浸润和髓鞘脱失等病理改变明显减轻,大脑、小脑、脑干、颈髓(颈膨大)、胸髓和腰髓(腰膨大)的炎症病理评分降低,差异有统计学意义(P＜0.01). (3)小胶质细胞Iba-1和星形胶质细胞GFAP免疫组化结果：生理盐水组大鼠CNS内小胶质细胞和星形胶质细胞增生活化明显,与生理盐水对照组相比,LPS处理组大鼠大脑、小脑、脑干、颈髓、胸髓和腰髓Iba-1阳性细胞和GFAP阳性细胞数目均明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05). (4)细胞因子ELISA检测结果：LPS处理组大鼠大脑、小脑、脑干、颈髓和腰髓内促炎细胞因子IL-17和IFN-γ表达水平较生理盐水组相比均明显降低,而抗炎细胞因子IL-10表达水平明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 (1)本实验采用GPSCH-CFA免疫诱导SD大鼠制作的EAE模型是成功的. (2)幼年时期给予LPS处理能够降低SD大鼠成年后EAE的发病率,减轻神经系统症状,减少中枢炎症细胞浸润和髓鞘脱失等病理改变,提示幼年感染细菌内毒素对大鼠成年后EAE有神经保护作用.(3)幼年时期给予LPS处理可能通过抑制大鼠成年后在GPSCH诱导下小胶质细胞和星形胶质细胞的增生活化,从而发挥对成年大鼠EAE的神经保护作用. (4)幼年时期给予LPS处理可能通过下调成年大鼠GPSCH诱导下CNS促炎细胞因子IL-17和IFN-γ的表达,上调抗炎细胞因子IL-10的表达,从而发挥对成年大鼠EAE的神经保护作用.