【摘 要】
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本试验首先建立新孢子虫速殖子的体外培养体系，分别用293T、HCT-8、Hela和Vero细胞培养新孢子虫速殖子，观察并计数速殖子数量和绘制生长曲线.吖啶噔染色并用激光共聚焦显微
【机 构】
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吉林大学动物医学学院,长春 130062
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医寄生虫学分会第十三次学术研讨会
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本试验首先建立新孢子虫速殖子的体外培养体系，分别用293T、HCT-8、Hela和Vero细胞培养新孢子虫速殖子，观察并计数速殖子数量和绘制生长曲线.吖啶噔染色并用激光共聚焦显微镜观察细胞内速殖子.以293T细胞为宿主细胞，利用Real time PCR及Western Blot等技术确定新孢子虫速殖子侵入293T细胞过程中EGFR及其下游PI3K/Akt信号通路、细胞凋亡和细胞骨架调节通路分子的变化.最后，分别用EGFR信号通路分子抑制剂处理293T细胞，速殖子感染后观察虫体感染细胞数量和细胞内虫体数量.试验结果表明：新孢子虫速殖子在293T、HCT-8和Vero细胞中生长较快，而在Hela细胞中速殖子生长较慢.新孢子虫侵入可明显上调EGFR、PI3K、Akt、Bad、Bcl-2、MUC1、Caveolin和E-cadherin基因的表达，下调Bax和P53基因的表达，但不影响Paxillin和β-catenin基因的表达.新孢子虫侵入可磷酸化EGFR、Akt和Bad.AG1478和LY294002可减少新孢子虫对宿主细胞EGFR、Akt和Bad的磷酸化.在24h AG1478和Ⅳ处理组感染细胞数量和细胞内虫体数量明显减少.而LY294002处理组与对照组相比无明显变化.本研究为揭示新孢子虫与宿主互作机制和致病机制奠定了重要基础.
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