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目的和背景：急性肝功能衰竭(acute liver failure，ALF)病情危重，死亡率高。生物人工肝支持系统(bioartificial liver support system，BALSS)可使ALF患者顺利过渡到肝移植或肝再生。最理想的BALSS是采用成人肝细胞，但来源困难，在体外不增殖，难以大量临床应用。我室建立了永生化人肝细胞系(immortal hepatocyte cell line，IHCL)，可高活性、高密度培养，至今已连续传代超过200代。体外实验示IHCL具有比较完备的肝脏解毒、合成和生物转化功能。本研究在以上工作基础上，将IHCL高密度培养于大孔微载体，注射到四氯化碳(CCl4)诱导ALF鼠腹腔内，观察ALF鼠生存期及病理变化，以评价IHCL腹膜透析治疗ALF裸鼠的有效性和安全性，为应用IHCL构建人源性生物人工肝提供重要的体内实验依据。
方法：间隔24hr两次腹腔注射四氯化碳(剂量分别为2.8mg／kg和1.0mg／kg)建立BALB／c裸鼠ALF模型，将IHCL培养于大孔微载体cytopore 2上(3×106／ml，共2ml)注射于裸鼠腹腔内，同时设立阴性对照组(不加任何治疗)，空载体对照组(给予等量空载体)，观察裸鼠14天生存率，取肝组织行病理学检查确定肝坏死情况，免疫组化分析肝细胞代谢解毒、生物合成、生物转化相关蛋白的表达。从腹腔取出微载体，用MTT方法检测IHCL存活情况。
结果：两次注射四氯化碳可成功建立裸鼠ALF模型，转氨酶升高10倍以上，肝组织大块坏死。IHCL能在大孔微载体上高密度、高活性培养。给予IHCL治疗后，ALF裸鼠14天生存率由对照组的096提高至83.3％(p＜0.01)，肝组织病理学示肝坏死显著减轻，肝再生明显，并可见长有IHCL的微载体填充了肝细胞坏死的缺损；免疫组化分析示IHCL表达参与胆红素、氨解毒的酶，表达参与生物转化的酶及合成凝血因子。从裸鼠腹腔取出的微载体MTT分析示细胞存活。
结论：IHCL能高活性、高密度地在大孔微载体上培养，IHCL腹膜透析能显著提高ALF裸鼠的生存率，减轻肝坏死，促进肝再生，适用于构建人源性生物人工肝。
方法：间隔24hr两次腹腔注射四氯化碳(剂量分别为2.8mg／kg和1.0mg／kg)建立BALB／c裸鼠ALF模型，将IHCL培养于大孔微载体cytopore 2上(3×106／ml，共2ml)注射于裸鼠腹腔内，同时设立阴性对照组(不加任何治疗)，空载体对照组(给予等量空载体)，观察裸鼠14天生存率，取肝组织行病理学检查确定肝坏死情况，免疫组化分析肝细胞代谢解毒、生物合成、生物转化相关蛋白的表达。从腹腔取出微载体，用MTT方法检测IHCL存活情况。
结果：两次注射四氯化碳可成功建立裸鼠ALF模型，转氨酶升高10倍以上，肝组织大块坏死。IHCL能在大孔微载体上高密度、高活性培养。给予IHCL治疗后，ALF裸鼠14天生存率由对照组的096提高至83.3％(p＜0.01)，肝组织病理学示肝坏死显著减轻，肝再生明显，并可见长有IHCL的微载体填充了肝细胞坏死的缺损；免疫组化分析示IHCL表达参与胆红素、氨解毒的酶，表达参与生物转化的酶及合成凝血因子。从裸鼠腹腔取出的微载体MTT分析示细胞存活。
结论：IHCL能高活性、高密度地在大孔微载体上培养，IHCL腹膜透析能显著提高ALF裸鼠的生存率，减轻肝坏死，促进肝再生，适用于构建人源性生物人工肝。