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为了探讨金属蛋白酶在鳗弧菌致病中的作用，设计PCR引物扩增并克隆了牙鲆致病性鳗弧菌的金属蛋白酶结构基因。根据得到的金属蛋白酶基因设计PCR引物扩增同源片段，亚克隆于自杀质粒pNQ705，转化具有接合功能的大肠杆菌S17-1。含重组自杀质粒的S17-1与野生型鳗弧菌M3接合，同源重组插入鳗弧菌金属蛋白酶基因使其失活。PCR及序列分析证明了重组自杀质粒的正确插入。经血清学鉴定，该突变株保持野生型菌株的菌体抗原，但生长速率明显幔，其胞外产物蛋白图谱与野生型的有较大区别，蛋白酶的比活也大大下降，特征性的36KD金属蛋白酶条带消失。金属蛋白酶突变株的构建为研究鳗弧菌的致病机理打下了基础。