转录因子AIOLOS在急性淋巴细胞白血病中的表达及其功能的研究

来源 :山东省儿科2016年学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxbear0
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  目的:构建AIOLOS的慢病毒过表达载体并转染Nalm-6细胞,研究AIOLOS过表达对白血病细胞生物学行为的影响,探讨AIOLOS影响白血病细胞生物学行为的作用机制。方法:以健康儿童B淋巴细胞为对照,采用实时荧光定量PCR及Western blotting法分别检测AIOLOS在白血病细胞系中的表达;构建AIOLOS慢病毒过表达载体,转染B-ALL细胞系Nalm-6并进行表达鉴定,将Nalm-6细胞分为三组:实验组,即AIOLOS过表达载体转染组(Nalm-6-AIOLOS);阴性对照组,即空载体转染组(Nalm-6-Mock);空白对照组,即未经转染的Nalm-6细胞(Nalm-6-Control),以CCK-8法检测细胞增殖并绘制增殖曲线;以流式细胞术检测细胞周期分布及细胞凋亡;以CCK-8法检测三组细胞对VCR或DNR的敏感性;以Transwell细胞迁移实验检测Nalm-6细胞的侵袭能力;以实时荧光定量PCR法检测 BCL-2、BAX、P27、CyclinD3、C-MYC、VEGF、PLGF和ANG1基因的表达;以Western blotting法检测BCL-2、P27、CyclinD3蛋白的表达;以流式细胞术检测PI3K/Akt信号通路的活化情况。
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