【摘 要】
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目的内毒素（Lipopolysaccharides,LPS）是多种革兰氏阴性菌细胞壁的组成成分。在养殖业发展中畜禽易受革兰氏阴性菌感染,菌体裂解而释放大量内毒素,进入肝脏后引起肝脏的损伤。本文运用LPS诱导雏鸡肝损伤模型,旨在探讨JNK信号通路及细胞凋亡在LPS诱导的肝损伤中的作用,为进一步研究细菌感染性肝损伤的机制奠定理论基础。材料和方法将12只21日龄雏鸡随机分为对照组和LPS组,禁食12 h
【出 处】
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中国毒理学会第十次全国毒理学大会论文集
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目的内毒素（Lipopolysaccharides,LPS）是多种革兰氏阴性菌细胞壁的组成成分。在养殖业发展中畜禽易受革兰氏阴性菌感染,菌体裂解而释放大量内毒素,进入肝脏后引起肝脏的损伤。本文运用LPS诱导雏鸡肝损伤模型,旨在探讨JNK信号通路及细胞凋亡在LPS诱导的肝损伤中的作用,为进一步研究细菌感染性肝损伤的机制奠定理论基础。材料和方法将12只21日龄雏鸡随机分为对照组和LPS组,禁食12 h后腹腔注射LPS（60 mg·kg-1）,对照组注射等量生理盐水,12 h后心脏采血处死。分离血清检测血清转氨酶活性;肝脏用10%福尔马林固定液固定,H＆E染色法进行肝脏病理组织学观察;采用Western Blot法测定肝组织中JNK信号通路上游ASK1、MKK4和MKK7蛋白表达及磷酸化水平,JNK蛋白及下游cJun蛋白表达及磷酸化水平;采用Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡;应用Western Blot法检测抗凋亡蛋白Bcl-2及促凋亡蛋白Bax和caspase-3的表达。结果血清转氨酶活性结果显示,与对照组相比,LPS组血清转氨酶活性极显著上升（P＜0.01）。H＆E染色结果显示,对照组肝细胞形态正常,结构完整,肝索清晰;LPS组有大量炎性细胞浸润和出血点、肝索紊乱,核固缩。Western blot结果显示,与对照组相比,LPS组JNK信号通路上游ASK1、MKK4和MKK7蛋白表达和磷酸化水平极显著升高（P＜0.01）;LPS组JNK蛋白及其下游c-Jun蛋白表达和磷酸化水平极显著升高（P＜0.01）,表明LPS可以激活JNK信号通路,使其上下游蛋白表达和磷酸化水平升高。Hoechst 33258染色结果表明,对照组细胞核荧光均匀形态完整,与对照组相比,LPS组相对荧光强度极显著升高（P＜0.01）,并且出现核固缩。Western blot结果显示,与对照组相比,LPS组Bcl-2表达量极显著降低、Bax和caspase-3表达量极显著升高（P＜0.01）,表明在LPS诱导的雏鸡肝损伤中发生细胞凋亡。结论 LPS可以激活JNK信号通路,使其上下游蛋白表达和磷酸化水平升高,肝细胞凋亡,造成雏鸡肝损伤。
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