【摘 要】
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多重PCR是分子诊断领域中的关键技术,然而常规EP管中进行的多重PCR扩增面临引物易互相干扰的难题。本课题的目的就是开发一种基于微流控的多重PCR芯片来从根本上解决多重
【出 处】
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第九届全国微全分析系统学术会议、第四届全国微纳尺度生物分离分析学术会议、2014国际微流控芯片与微纳尺度生物分离分析学术
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多重PCR是分子诊断领域中的关键技术,然而常规EP管中进行的多重PCR扩增面临引物易互相干扰的难题。本课题的目的就是开发一种基于微流控的多重PCR芯片来从根本上解决多重PCR体系难以构建的问题。本课题开发的微流控芯片能将扩增体系分配到多个互相独立的反应单元中。每个反应单元预先固定一对特异引物,在热循环时引物和模板及扩增体系混合,最终用多个单重PCR实现多重PCR,并且灵敏度和常规PCR相当。本方法从根本上避免了多对引物互相干扰的问题,使得多重PCR能够简便地进行。本课题构建了针对不同扩增重数和体系大小的多款微流控芯片,并验证了其多重扩增的各项性能。在一张载玻片大小的塑料芯片上,我们实现了对8种致病菌及13种耐药基因质粒的鉴定。该芯片最多能实现150重PCR反应,每个单重PCR体系在1微升左右。
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