【摘 要】
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原位、动态分析单细胞线粒体内氧化还原的变化对于氧化还原损伤、细胞凋亡以及药物筛选等研究具有重要意义1,2.我们通过构建包括阵列微流控芯片、重力驱动、CO2和温度控
【机 构】
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山东师范大学化学化工与材料科学学院,分子与纳米探针教育部重点实验室,济南,250014
【出 处】
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第九届全国微全分析系统学术会议、第四届全国微纳尺度生物分离分析学术会议、2014国际微流控芯片与微纳尺度生物分离分析学术
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原位、动态分析单细胞线粒体内氧化还原的变化对于氧化还原损伤、细胞凋亡以及药物筛选等研究具有重要意义1,2.我们通过构建包括阵列微流控芯片、重力驱动、CO2和温度控制、荧光成像检测等单元的微流控装置,结合课题组近期合成的近红外可逆荧光探针(Cy-O-ebselen)3,实现了微流控芯片上MCF-7/MCF-10A单细胞的捕获、定位培养、在线标记以及热/N-Ethylmaleimide(NEM)刺激下两种细胞线粒体内氧化还原(H2O2/GSH)变化的原位、动态分析.研究发现：两种细胞线粒体内氧化还原变化与温度呈正相关；MCF-7细胞受44°C刺激1 h时,其氧化还原态失衡,但MCF-10A细胞更耐热；当热-NEM联合刺激时,细胞耐热性下降的同时氧化还原改变明显.此外,因氧化还原改变所致的细胞凋亡得到了细胞核染色、流式细胞术和蛋白质印迹实验的验证.实验表明：该装置和方法具有原位、长时间动态测量、通量高、操作简便等优点,可望为单一细胞模型上线粒体氧化还原(GSH/H2O2)变化与细胞生理的关联以及氧化还原调控为靶点的抗肿瘤药物筛选等相关研究领域提供一种新策略.
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