目的:根据前期氨氮污染胁迫菲律宾蛤仔的代谢组学结果,发现氨态氮影响一些神经信号前体物、蛋白质及能量代谢产物的含量,推测氨态氮对菲律宾蛤仔具有神经毒性,并可能会导致细胞凋亡,从而影响鳃等器官的正常功能。本研究通过检测菲律宾蛤仔体内的神经递质含量和细胞凋亡等毒性终点,来初步评价氨态氮对菲律宾蛤仔的损伤作用。方法:本研究根据以前的实验结果,采用环境污染相关浓度的氨氮(Low组:0.362 mg/L,Medium组:1.81 mg/L)对菲律宾蛤仔进行暴露实验,通过检测菲律宾蛤仔体内儿茶酚胺类神经递质含量来检测氨态氮对其造成的神经损伤,通过流式细胞仪技术检测血淋巴细胞和鳃组织的细胞凋亡情况来检测氨态氮对其造成的细胞损伤。结果:1.神经递质浓度的变化情况:(1)去甲肾上腺浓度随着氨氮浓度的增加而下降,在暴露一天后,中浓度氨氮暴露组的蛤仔体内去甲肾上腺素浓度显著下降,而低浓度暴露组的变化不明显。不过随着暴露时间的延长,在暴露后3天低浓度暴露组蛤仔体内的去甲肾上腺素浓度显著下降,而中浓度暴露组略有上升。(2)暴露后一天,肾上腺素浓度的变化情况如同去甲肾上腺素,中浓度暴露组蛤仔体内的肾上腺素浓度显著下降;不过,暴露3天后,两个暴露组蛤仔体内的肾上腺素浓度都显著下降。(3)氨氮暴露对菲律宾蛤仔体内多巴胺浓度的影响并不显著,在暴露后1天和3天,低浓度暴露组和中浓度暴露组均未出现显著性变化。2.细胞凋亡情况(1)血淋巴细胞凋亡情况菲律宾蛤仔受到氨态氮胁迫后,低浓度氨氮暴露1天导致血淋巴细胞的早期凋亡显著比对照组下降,中浓度暴露组变化不显著;3天后,低浓度暴露组个体间差异增大,与对照组的差异不显著,而中浓度暴露组的早期凋亡显著增加。统计各组的晚期凋亡/死亡程度和总凋亡程度发现,对照组和低浓度暴露组、中浓度暴露组间的差异不显著。(2)鳃组织细胞凋亡情况氨态氮胁迫菲律宾蛤仔后,鳃组织出现显著的凋亡情况。胁迫1天后,中浓度暴露组出现显著的早期凋亡,低浓度暴露组的凋亡不显著;胁迫3天后,两个暴露组均出现显著的早期凋亡。不过,低浓度和中浓度暴露组的晚期凋亡/死亡和总凋亡情况与对照组的差异不显著。结论:氨态氮可以显著影响菲律宾蛤仔体内的去甲肾上腺素和肾上腺素含量,对多巴胺含量的影响并不显著,说明氨态氮可以显著影响菲律宾蛤仔的神经信号传递,推测氨态氮可以扰乱菲律宾蛤仔的行为轨迹以及其他生理生化功能;氨态氮可以显著影响菲律宾蛤仔鳃组织细胞的凋亡速率,影响其正常功能发挥。