【摘 要】
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为了构建表达辛德毕斯病毒E基因的重组痘苗病毒,本研究通过基因重组的方法将辛德毕斯病毒E基因及绿色荧光蛋白(EGFP)基因分别连接到痘苗病毒转移载体pSTK上,酶切鉴定得到阳性
【机 构】
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中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春130122
【出 处】
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第二届全国病毒感染与器官功能衰竭学术会议
论文部分内容阅读
为了构建表达辛德毕斯病毒E基因的重组痘苗病毒,本研究通过基因重组的方法将辛德毕斯病毒E基因及绿色荧光蛋白(EGFP)基因分别连接到痘苗病毒转移载体pSTK上,酶切鉴定得到阳性重组质粒pSTK-SINE-EGFP.通过脂质体转染的方法,将该重组质粒与痘苗病毒天坛株共转染BHK-21细胞,通过同源重组获得重组痘苗病毒.利用EGFP筛选阳性重组痘苗病毒vTTVV-SINE-EGFP,收集感染重组痘苗病毒的BHK-21细胞,SDS-PAGE电泳检测辛德毕斯病毒E基因在细胞中的表达情况,Western blot分析表达产物的免疫原性.结果证明：辛德毕斯病毒E基因能在重组痘苗病毒vTTVV-SINE-EGFP中获得表达,且表达产物具有良好的免疫原性.表达辛德毕斯病毒E基因的重组痘苗病毒成功构建,为研制辛德毕斯病毒活载体疫苗奠定了基础.
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