【摘 要】
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生物质谱技术在蛋白质快速鉴定和定量分析中起着重要作用.稳定同位素标记与高分辨质谱技术的结合推动了蛋白质组学的快速发展.然而,蛋白质组学样品的复杂性以及蛋白质的
【机 构】
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厦门大学药学院,福建省厦门市,361102
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生物质谱技术在蛋白质快速鉴定和定量分析中起着重要作用.稳定同位素标记与高分辨质谱技术的结合推动了蛋白质组学的快速发展.然而,蛋白质组学样品的复杂性以及蛋白质的深度覆盖和定量对质谱分析新技术提出了挑战.N-磷酰化蛋白质标记化学源于生命起源研究--核酸与蛋白共起源N-磷酰化氨基酸分子模型[1].1988年,N-磷酰化标记反应在水环境中成功应用于20种N-磷酰化氨基酸的合成,随后该标记方法被用来进行氨基酸、小肽及多肽的质谱分析和测序研究.研究发现,该标记技术对蛋白质多肽的N-端和侧链氨基具有定量的标记效率；同时,标记的磷酰基在ESI和MALDI两种离子源下具有增敏效应,例如氨基酸分别能增加100倍及30倍左右.[2-3]基于近30年的研究结果,我们于2012年首次把基于有机磷化学的N-磷酰化标记技术成功引入到蛋白质的测序和定量分析领域,考察了第一代稳定同位素N-磷酰化标记技术(SIPL),发现N-磷酰化标记能大大简化蛋白酶解多肽在气相状态下的裂解行为,有利于氨基酸残基的归属分析；对标准混合蛋白的简单体系相对定量分析中具有良好的准确性和线性范围.[4]本研究将基于磷化学设计合成并考察第二代稳定同位素N-磷酰化标记技术在蛋白质测序和定量分析方面的应用.
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