【摘 要】
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为获得阿维拉霉素高产菌株,采用核糖体工程技术对实验室保存的阿维拉霉素产生菌进行改造,通过核糖体技术,使用链霉素对Streptomyces viridoehrongenes gs77 进行抗性选育
【机 构】
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浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310018
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为获得阿维拉霉素高产菌株,采用核糖体工程技术对实验室保存的阿维拉霉素产生菌进行改造,通过核糖体技术,使用链霉素对Streptomyces viridoehrongenes gs77 进行抗性选育,得到223 株生长良好的链霉素抗性突变菌株.通过初筛和复筛获得一株产阿维拉霉素能力较强的链霉素抗性正变菌株S.viridoehrongenes gs77-54,并对突变前后的菌株形态特征和rpsL 基因(编码核糖体蛋白S12)进行研究分析,获得一株比出发菌株提高了75.20％的阿维拉霉素高产突变菌株S.viridoehrongenes gs77-54,其阿维拉霉素摇瓶产量7d 达到1395.79mg/L,传代实验表明突变菌S.viridoehrongenes gs77-54 高产性能遗传稳定,突变菌株的气生菌丝较为粗壮、长直形,孢子为椭圆形,直径约1.1μm ×0.6μm,与出发菌株存在明显区别.rpsl 基因序列分析结果发现,在该基因片段中出现点突变,第356 位的G 突变为A,由精氨酸突变为谷氨酰胺,实验结果表明核糖体工程技术可用于阿维拉霉素高产菌株的选育.
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