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乳酸是猪肠道微生物代谢中间产物,健康猪肠道中乳酸浓度较低,但是乳酸特别是D型乳酸积累常与动物肠道疾病存在关联,因此,研究乳酸的代谢特性对于指导动物生产有重要意义.利用体外发酵技术比较猪粪样微生物对D型和L型乳酸的发酵特性.首先测定了健康猪粪样中的D型和L型乳酸的浓度,发现D型和L型乳酸占总乳酸的比例平均分别为32%和68%.在此基础上,以仔猪粪样为接种物,以不同浓度(5mmol/L和25mmol/L)D型乳酸、L型乳酸和DL型乳酸(D型乳酸∶L型乳酸=1∶2)为底物,进行体外发酵.分别于发酵6h、12h、24h、48h采集样品,测定乳酸、乙酸、丙酸和丁酸浓度;提取24h25 mmol/L乳酸底物组样品细菌总核酸,用于454高通量测序分析菌群多样性.结果表明:在5mmol/L浓度下,仔猪粪样微生物对D型、L型和DL型乳酸利用速度无显著差异;而在25 mmol/L浓度下,对DL型混合乳酸利用速度最快,L型次之,D型最慢,发酵48h后,各型乳酸均被完全利用.仔猪粪样菌群发酵D型和L型乳酸主要产生乙酸和丙酸,丙酸的产生量和底物浓度具有相关性.高通量测序分析表明:在门水平上,3组乳酸底物的发酵样品中的菌群组成无显著差异,在属水平,D型乳酸组Coprococcus,Subdoligranulum属占总菌比例显著低于L型和DL型乳酸组,而Ruminococcus,unclassified Clostridiales和unclassified Lachnospiraceae占总菌比例显著高于其他两中底物组;与接种物中菌群组成相比,以乳酸为底物发酵24h后,Coprococcus,Desulfovibrio和Oscillibacter属被10倍以上富集,而Blautia,Clostridium,Dorea和Faecalibacterium属占总菌比例仅为发酵前的0.1 ~0.5.结果提示,在高浓度条件下,猪粪样微生物利用不同构型乳酸存在差异,这种差异与猪粪样中利用特定构型乳酸的菌群组成有关.