【摘 要】
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本文结合滚环扩增(RCA)技术,以Co2+ /ABEI-AuNFs作为能量供体,以层状WS2作为能量受体构建了化学发光共振能量转移体系实现对金黄色葡萄球菌的检测.目的：金黄色葡萄球菌是
【机 构】
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江南大学食品学院 江苏无锡214122
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本文结合滚环扩增(RCA)技术,以Co2+ /ABEI-AuNFs作为能量供体,以层状WS2作为能量受体构建了化学发光共振能量转移体系实现对金黄色葡萄球菌的检测.目的：金黄色葡萄球菌是最常见的食源性致病菌之一,极少量的菌体存在就会对人体健康造成很大的威胁.因此建立快速,灵敏,高效的检测方法意义重大.方法：首先将金黄色葡萄球菌适配体与RCA引物进行DNA杂交,在靶标存在时,适配体会与靶标结合引起引物的脱落.然后,加入锁式探针,RCA反应得以启动.RCA产物互补链修饰的ABEI-AuNFs(cDNA-ABEI-AuNFs)可与RCA产物进行多位点结合.最后,向体系中加入WS2,未结合cDNA-ABEI-AuNFs与WS2发生化学发光共振能量转移而引起化学发光的淬灭.因此,体系的化学发光强度与靶标浓度正相关.结果与讨论：在最优的检测条件下,化学发光强度与金黄色葡萄球菌浓度的负对数线性相关,其线性范围为50cfiu/mL-1.5×105 cfu/mL(R2=0.9913),检测限为15cfu/mL.特异性结果结果显示该方法特异性良好.猪肉中实际样品检测与平板涂布方法进行对照,检测结果一致性良好.
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