艰难梭菌毒素TcdB单克隆抗体的制备及其在艰难梭菌感染诊断中的应用

来源 :2016第五届中国食品安全高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chianbean
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  艰难梭菌(Clostridium difficile)被认为是目前导致抗生素相关腹泻的主要致病菌.在过去十年里,艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)在全世界范围内的发病率及死亡率持续呈上升趋势.但是,由于CDI所引起的腹泻等症状与其他病因引起的症状并没有明显的区别,因此实验室诊断在CDI的诊断中起着关键性作用.艰难梭菌毒素A(TcdA)及毒素B(TcdB)是艰难梭菌的主要致病因子.本研究致力于制备具有高灵敏度的抗TcdB单克隆抗体并构建有效的TcdB胶体金快速检测平台,对CDI的诊断提供新的高灵敏度的抗体及有效的检测方法.本研究以构建并纯化得到的无毒的艰难梭菌毒素突变体aTcdB作为抗原,免疫小鼠,制备并筛选得到四株抗TcdB的单克隆抗体.经过抗体的配对后,抗体对A7-G2被成功应用于TcdB胶体金快速检测平台的初步构建,并使用90个临床粪便样品(40个阳性样品,50个阴性样品)对此检测平台进行了初步的评价,其特异性及灵敏度分别为90% (95%CI: 78.2%-96.7%)及92.5% (95% CI: 79.6%-98.4%).
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