用4重PCR诊断一起猪圆环病毒Ⅱ型和猪细小病毒混合感染

来源 :中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gfjgds
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近年来,随着我国畜牧业生产快速发展,国内外贸易日趋繁荣.但由于牲畜流动频繁、饲养管理粗放、免疫不到位等原因,猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)及其并发其它猪病的混合感染普遍流行,严重危害养猪业的发展。猪圆环病毒病的病原为圆环病毒Ⅱ型(PCV-2),是近年来新发现的一种新的免疫抑制病,包括:断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎和肾病综合症(PDNS)、母猪繁殖障碍、猪间质性肺炎、传染性先天性震颤五种类型。猪细小病毒病(PPV)是引起母猪繁殖障碍性疾病的主要病原之一。其特征是妊娠猪在怀孕前容易受到感染,可引起胚胎或胎儿的感染和死亡,导致母猪发生流产、死胎,胎儿木乃伊化及新生仔猪的死亡,育肥猪发生皮炎、腹泻、关节炎,猪场一旦感染,3个月内100%感染,感染猪很长时间带毒、排毒,对养猪业的危害非常严重。本文介绍了猪圆环病毒Ⅱ型和猪细小病毒混合感染的临床症状和剖检病变,分析了实验室的诊断方法,提出了相应的防控措施。
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副粘病毒可以引起一系列猪病,给养猪业带来了重大损失,同样给人类带来的严重的威胁.国内关于猪副粘病毒病的最早报告是在2000年,本实验室于2006年在发病猪体内分离出一病毒,后经分子鉴定属于副粘病毒,为禽副粘病毒Ⅰ型(APMV-1),并对其进行了生物学特性分析.
以纯化的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过间接ELISA方法对融合细胞进行筛选,阳性细胞经有限稀释法进行4次亚克隆后,获得了3株能稳定分泌抗重组N蛋白抗体的杂交瘤细胞,分别命名为JY(4)-1、JY(4)-2、JY(4)-3.间接ELISA检测3株杂交瘤细胞的细胞培养上清及免疫小鼠制备的腹水和血清中的抗体效价均为1:512、1
将猪细小病毒(PPV)免疫的BALB/c小鼠脾细胞与SP2/0细胞在聚乙二醇作用下融合,用ELISA方法筛选,以有限稀释法稀释3次,得到分泌抗PPV单克隆抗体(McAb)细胞株15株,并对其进行较详细的染色体计数、抗体亚类、ELISA交叉实验、Western blotting等生物学特性鉴定.染色体计数发现其核内染色体数均符合杂交瘤细胞染色体数,抗体属性为IgG1,交又实验等特异性分析发现该单抗只
首先以本室构建的包含Aisa 1型FMD流行毒株JL株全长P1-2A基因为模板,扩增出上游包含EcoR Ⅰ和下游包含有Xho Ⅰ的P1-2A基因,长度为2250bp.并克隆到pMD18T载体上,转入JM 109中.然后,将P1-2A基因连接到原核表达栽体pGEX-6p-1上,构建了重组表达质粒pGEX-6p-1-P1-2A,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达.SDS-PAGE电泳表明,P1-2A基因
口蹄疫病毒P1和3C基因联合表达能够产生完整的口蹄疫病毒衣壳蛋白,并形成无核酸的与原病毒外形一致的全新的空衣壳,该空衣壳具有与口蹄疫病毒颗粒相同的抗原特性,免疫动物后能诱导产生抗口蹄疫病毒特异性中和抗体,是开发安全高效口蹄疫重组疫苗的理想途径.本文对口蹄疫P1、3C基因及其对应的蛋白功能和P1、3C基因联合表达研究最新进展进行综述,对P1、3C基因联合表达重组疫苗的潜在优点也进行了讨论.
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在中国的猪血清中分离到一新因子,命名为P2.P2为闭合环状基因组,全长993个核苷酸.序列分析表明其与猪圆环病毒密切相关.随后对构建的P2因子分子克隆的体外感染性进行了研究.结果表明,在转染PK-15细胞后,只有P2因子的双拷贝串联分子克隆具有感染性,表现为可在细胞的胞浆和胞核中形成包涵体,胞浆包涵体为圆形或不规则性,直径0.1~0.4 μm;胞核包涵体有两种类型,一种为小而圆,直径约0.1μm的