【摘 要】
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目的:应用大鼠肝大部切除肝再生模型,将前期构建好的靶向SMAD3基因的shRNA重组慢病毒注射入大鼠体内,观察SMAD3 shRNA对大鼠肝再生的影响。方法:将60只♂Wistar大鼠随机分为3
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目的:应用大鼠肝大部切除肝再生模型,将前期构建好的靶向SMAD3基因的shRNA重组慢病毒注射入大鼠体内,观察SMAD3 shRNA对大鼠肝再生的影响。方法:将60只♂Wistar大鼠随机分为3组:SMAD3 shRNA组(20只)、shRNA对照组(20只)、生理盐水对照组(20只),通过脾脏注射方法给药,慢病毒给药剂量为1.0×108 TU/只,生理盐水对照组给予等体积500 μL生理盐水.给药96h后行2/3肝大部切除,构建大鼠肝再生模型;肝大部切除术后96 h各组分别除死大鼠7只,剩余大鼠于144 h处死,收集肝脏标本,Real-Time PCR、免疫组织化学检测肝组织SMAD3表达,免疫组织化学检测肝组织Ki67表达,测定大鼠肝质量/体质量,观察SMAD3shRNA对肝再生的影响.结果:Real-Time PCR检测显示，通过脾脏注射慢病毒，在96、144 h处死时间点，SMAD3shRNA组SMAD3 mRNA分别较shRNA对照组平均下降73％、63％.免疫组织化学检测显示SMAD3蛋白表达明显下降.Ki67免疫组织化学结果显示，肝大部切除术后96、144h，SMAD3shRNA组Ki67表达阳性细胞数均明显多于生理盐水对照组及shRNA对照组，表明抑制SMAD3表达后肝细胞增殖活跃.大鼠肝质量与体质量比值显示，SMAD3 shRNA组分别较生理盐水对照组及shRNA对照组有增加趋势(96 h:4.50±0.43 vs 3.97±0.55 vs 3.98±0.40, 144 h: 4.66±0.54 vs4.15±0.51 vs4.20±0.34)，但没有统计学意义(P>0.05).结论:SMAD3 shRNA在大鼠体内可一定程度上促进肝细胞增殖，但对肝再生的促进作用尚弱.
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