【摘 要】
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利用PCR的方法,从猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)四川资阳分离株449-1扩增出cps2J基因,克隆到pMD18-T载体中,构建质粒pMD18T-cps2J.以SalI和BamHI从pMDl8T-cps2
【机 构】
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军事医学科学院军事兽医研究所 内蒙古民族大学生命科学学院
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会
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利用PCR的方法,从猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)四川资阳分离株449-1扩增出cps2J基因,克隆到pMD18-T载体中,构建质粒pMD18T-cps2J.以SalI和BamHI从pMDl8T-cps2J中切下目的cps2J基因片段并克隆到质粒pMAL-p2X中,构建重组表达质粒pMALp2X-cps2J,转在宿主菌TB1中进行诱导表达.SDS-PAGE电泳检测结果表明,重组菌株表达出了136 kD左右的目的蛋白MBP-cps2J,目的蛋白为可溶表达,约占菌体蛋白总量的13.5％.表达的蛋白可用Amylose树脂层析柱纯化.将纯化的融合蛋白MBP-cps2J免疫家兔,利用制备的抗血清经ELISA和协同凝集试验检测,与SS2型呈特异性阳性反应.本试验研究了SS2型cps2J的克隆与高效表达,并将协同凝集试验用于SS2型检测.
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