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采用氧化石墨烯修饰聚合物微球,制备了一种新型的胰蛋白酶固定化酶反应器,实现了蛋白质的同时酶解和18O标记。为了评价该酶反应器的性能,采用BSA为样品对该酶反应器进行了评价。结果表明,与传统离线方法相比,采用该酶反应器,无论是1SO标记效率(99%vs95%),还是样品预处理时间(2.5min vs36h)均得到了显著的提高。此外,将该酶反应器与2D-nanoLC-MS在线联用,并用于小鼠腹水淋巴道高低转移细胞株差异蛋白质分析,结果表明,采用该集成化分析平台,三针可共同定量1750种蛋白质(CV<50%),其中89种蛋白质上调,32种蛋白质下调,且多数差异蛋白质与文献报道的趋势一致,显示出了高通量筛选潜在标志物的潜力。