【摘 要】
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将本实验室保存的一株La Sota病毒用有限稀释法接种鸡胚进行纯化,连续传代五次后筛选到一株高血凝效价的纯培养克隆株,命名为La Sota C5,并对其进行全基因组测序,克隆株
【机 构】
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中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241
【出 处】
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第四届人畜共患病学术研讨会、2014年中国狂犬病年会、中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第四次学术研讨会
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将本实验室保存的一株La Sota病毒用有限稀释法接种鸡胚进行纯化,连续传代五次后筛选到一株高血凝效价的纯培养克隆株,命名为La Sota C5,并对其进行全基因组测序,克隆株与亲本株在生物学特性与基因序列上都存在一定的差异;参照La Sota C5株全基因序列单酶切位点,用RT-PCR的方法将基因组分8段扩增,按照病毒基因组的结构顺序,将克隆片段定向插入到TVT转录载体中,成功构建含有病毒全长cDNA的转录载体TVT-La SotaC5;将TVT-La Sota C5与辅助质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L共转染BSR-T7/5细胞,成功拯救出了具有感染性的新城疫病毒rLa Sota.病毒的成功拯救为后续基因功能和疫苗载体开发等方面的研究提供了平台.
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