IL-6通过STAT3/miR-21调控炎症反应在亚砷酸钠所致HBE细胞恶性转化中的作用

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目的研究白介素6(IL-6)调控信号转导与转录激活子3(STAT3)/微小RNA-21(miR-21)在低水平亚砷酸钠(NaAsO2)诱导炎症反应所致支气管上皮(HBE)细胞恶性转化中的作用,为寻找砷化物致癌的早期生物学标志及发现新的防治措施提供新的线索。方法 NaAsO2 1.0μmol·L-1处理HBE细胞不同时间后,逆转录PCR(RT-PCR)检测IL-6 mRNA水平,Western blot检测细胞STAT3蛋白水平,实时定量PCR(qRT-PCR)检测细胞miR-21水平及其变化情况;并应用siRNA关闭STAT3、转染anti-miR-21下调miR-21及应用IL-6中和抗体阻滞IL-6后,进一步观察恶性转化HBE细胞STAT3,vimentin,N钙黏蛋白和E钙黏蛋白水平及miR-21水平,并应用免疫荧光染色检测vimentin,N钙黏蛋白和E钙黏蛋白表达水平及细胞定位。结果 1.0μmol·L-1 NaAsO2引起HBE细胞IL-6 mRNA水平升高,且NaAsO2处理HBE细胞15,30 min,1,3,6,12和24 h后,STAT3能被NaAsO2瞬时被激活;STAT3水平3 h明显升高,并于6 h达到高峰;在处理3,6,12和24 h后,HBE细胞miR-21水平升高,其高峰表现在12 h;并且在NaAsO2所致慢性恶性转化HBE细胞miR-21水平随着细胞代数(恶性程度)增加而逐渐升高;应用siRNA关闭STAT3后,细胞miR-21水平也随之降低;应用IL-6中和抗体阻滞IL-6后,细胞STAT3和miR-21水平均显著低;IL-6中和抗体处理处理30代恶性转化HBE细胞后,其EMT发生明显逆转,即间质细胞标志vimentin和N钙黏蛋白水平明显降低,而上皮细胞标志E钙黏蛋白水平升高,说明发生了EMT现象,而且细胞恶性程度也明显降低。结论 IL-6通过STAT3/miR-21调控炎症反应在亚砷酸钠所致HBE细胞发生EMT和恶性转化过程中发挥重要作用。
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