被动皮肤过敏反应试验方法探索

来源 :第九届药物毒理学年会——新时代·新技术·新策略·新健康论文集 | 被引量 : 0次 | 上传用户:woaini009
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目的:观察大鼠和豚鼠给予卵白蛋白溶液的被动皮肤过敏反应情况,为被动皮肤过敏试验阳性对照组的给药方法和动物选择提供参考。方法:将20只SD大鼠(雌雄各半)随机分为2组,将20只豚鼠(雌雄各半)随机分为2组,分别为大鼠给药组,大鼠加佐剂给药组,豚鼠给药组,豚鼠加佐剂给药组。本试验分两个阶段:(1)抗血清制备阶段:致敏时,大鼠给药组和豚鼠给药组只给卵白蛋白溶液;大鼠加佐剂给药组和豚鼠加佐剂给药组给药溶液分别与佐剂按1:1 (体积比)混合后给予。隔日皮下注射1次致敏,共致敏3次;末次致敏后9d,腹主动脉取血制备抗血清。(2)被动致敏及激发阶段:各组抗血清按原液、1:2、1:4、1:8稀释后背部皮内注射给予各组未进行致敏的每只动物,每个稀释度0.1 mL/点。豚鼠给药组的雌性动物和豚鼠加佐剂给药组的雄性动物皮内注射约4h后,经静脉注射与第1阶段相同剂量的激发抗原与依文思蓝等量混合液。剩余各组动物皮内注射约24h后,经静脉注射与第1阶段相同剂量的激发抗原与依文思蓝等量混合液。注射约30min后,各组大鼠经戊巴比妥钠麻醉后腹主动脉放血安乐死,测量皮肤内侧蓝斑的长径和短径。结果:大鼠给药组两只雌性大鼠注射部位皮内见无序分散小蓝斑,剩余动物均未见蓝斑;大鼠加佐剂给药组注射部位皮肤各稀释度下蓝斑直径均大于5 mm;豚鼠给药组4h激发的雌性动物注射部位皮肤各稀释度下蓝斑直径均大于5 mm;豚鼠加佐剂给药组4h激发的雌性动物一只未见蓝斑,两只动物注射部位皮肤各稀释度下蓝斑直径均大于5 mm,蓝斑颜色较浅;豚鼠给药组24h激发的雄性动物一只给药后即可死亡,两只动物未见蓝斑;豚鼠加佐剂给药组24h激发的雄性动物均给药后即刻死亡。结论:在本试验条件下,24h激发的大鼠加佐剂组和4h激发的豚鼠给药组呈阳性反应。故大鼠被动皮肤致敏试验需要佐剂辅助供试品致敏,激发时间为24h;豚鼠被动皮肤致敏试验不需佐剂辅助致敏,激发时间为4h。
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