Development and validation of a method for the determination of a therapeutic peptide Thymosin β4 in

来源 :第十届全国药物和化学异物代谢学术会议暨第三届国际ISSX/CSSX联合学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:moxiaomi521
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  Thymosin β4 (M.W.4976 Da; 44 amino acid peptide) has been investigated for the treatment of miocardial infarction.A bioanalytical assay based on ultra fast liquid chromatography coupled with electrospray ionization tandem mass spectrometry (LC/MS/MS) to quantitate the peptide in cynomolgus monkeys plasma was developed and validated to support preclinical trials designed to evaluate the safety, toxicokinetics and pharmacokinetics of this peptide.Plasma samples (0.1 mL) were extracted by protein precipitation using methanol and concentrated by methylene chloride with mutual solubility of methanol and methylene chloride.The resulting samples were analyzed using an Applied Biosystems API4000QTrap UFLC-MS/MS with an electrospray ionization (ESI) source operating in the positive ionization mode.The method was validated for the determination of the peptide in cynomolgus monkeys plasma over the concentration range of 3-1000 ng/mL.lsotopically labeled peptide (13C615N2-Thymosin β4) was used as an internal standard.Precautions had to be taken to separate this peptide with endogenous interference and prevent adsorption to container surface.This validated method was sensitive, with acceptable good precision, accuracy and can be used in support of preclinicai trials.
其他文献
目的 研究两种苯磺酸左旋氨氯地平片在健康受试者体内的生物等效性.方法 20名健康男性受试者随机交叉单次口服受试制剂和参比制剂5 mg(2片),于服药前(0 h)至服药后120 h内采集静脉血,共采集15次.采用HPLC—MS/MS法测定血浆样品中氨氯地平的血药浓度,求算有关药动学参数和试验制剂的相对生物利用度.结果 试验制剂和参比制剂的主要药代动力学参数Cmax分别为(3.50±1.39)和(3.
会议
Objective To investigate the in vitro stereoselective metabolism of phencynonate as a novel anticholinergic chiral drug.Method The two enantiomers of phencynonate were isocratically separated and dete
目的 建立一种检测次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)活性的高效液相色谱法.方法 在5-磷酸核糖-1-焦磷酸(PRPP)条件下,HGPRT催化次黄嘌呤生成次黄嘌呤核苷酸(IMP),高氯酸沉淀蛋白后进行高效液相色谱法分析.采用Hypersil ODS C18(150 mm×4.6 mm,5μm)柱;流动相磷酸氢盐缓冲液-乙腈(99.6-0.4,V∶V),1 mL/min,在262 nm处检测I
目的 建立一种简便和快速的液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS),同时测定转移性肾细胞癌患者血浆中的舒尼替尼及其代谢物.方法 以甲醇/乙腈(1∶1,v/v)为沉淀剂,对血浆进行一步蛋白沉淀预处理.色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱,流动相包括0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱,流速为0.50 mL/min.采用电喷雾离子化(ESI),正离子扫描,舒尼替尼及其代谢物
目的 拉莫三嗪(Lamotrigine,LTG)是第二代抗癫痫药,其血药浓度个体间差异较大,因此本实验拟建立检测血浆中LTG浓度的高效液相色谱法,应用于服用LTG癫痫患者的治疗药物监测(TDM).方法 选用非那西丁为内标,检测波长为240 nm,使用Xterra MS C 18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)为分析柱,先碱化血浆再进行液-液萃取提取,萃取剂为乙酸乙酯-二氯甲烷-叔丁基甲
目的 研究Caco-2细胞模型在黄药子肝毒性评估中的应用.方法 75%乙醇回流提取得黄药子提取物,高、中、低剂量作用于Caco-2细胞,以经Caco-2细胞的摄取物作用于HL-7702细胞和HepG2细胞,进行细胞活性实验,测定生化指标ALT、AST、GSH-PX和MDA值.结果 与对照组比,高剂量组和中剂量组黄药子醇提物Caco-2细胞摄取液作用后,HL-7702细胞和HepG2细胞的存活率显著
目的 建立并确证一种简单、灵敏、特异的HPLC-MS/MS法,同时测定犬血浆中5种环烯醚萜苷类化合物栀子苷、去乙酰车叶草甘酸甲酯、羟异栀子苷、山栀苷、京尼平龙胆二糖苷的血浆药物浓度.方法 血浆样品由甲醇沉淀蛋白后,经Ecosii C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离.流动相为甲醇(A)-20 mM甲酸铵、0.1%甲酸及10%甲醇水溶液(B),梯度洗脱,流动相A的初始比例为15%,
目的 应用清醒动物自动采样技术和传统采样方法对TY6052在大鼠体内的药动学进行研究,比较两种采样方法对TY6052药动学参数的影响.方法 成年Wistar大鼠12只,随机分为2组,雌雄各半.大鼠静注1.0 mg/kg TY 6052供试品后不同时间点分别采用清醒动物自动采样技术与传统手动采样方法采集大鼠血样,经LC-MS/MS方法分析测得不同时间的血药浓度,应用DAS 2.1.1计算程序、非房室
目的 泮托拉唑是一种质子泵抑制剂,临床上用于治疗消化道溃疡等疾病.由于其分子结构中有一手性硫原子,因此存在一对对映异构体.本文建立了用手性柱分离的色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法,可同时测定动物血浆中泮托拉唑两种对映体的浓度,可同时估算两者的药代动力学参数.用该方法分析了两种对映体在动物体内的构型转化.方法 比格犬和大鼠血浆用含内标左旋兰索拉唑的乙酸乙酯提取后,45℃条件下氮气挥干,经乙腈-
会议
氯高铁血红素因其化学性质较稳定,一直用于血红素铁吸收的研究中.但铁元素在各种基质中存在严重的背景干扰,给铁吸收研究带来很大的困难.本实验首先成功对氯高铁血红素进行58Fe稳定性标记.同时在使用CCT模式并采用数学公式对干扰进行校正的情况下,建立了快速、灵敏、专一的电感耦合等离子体质谱测定(ICP-MS)法.该方法样品处理简单,分析时间短,线性范围在0.005~1.0μg/mL.精密度和准确度均符合