【摘 要】
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本文构建血红素氧合酶-2(HO-2)真核表达载体pEF1 α-HO-2-AcGFP,并观察其在小鼠脑血管内皮细胞中的表达情况.利用PCR技术从C57BL/6小鼠海马组织中扩增出HO-2基因cDNA序列,用
【机 构】
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徐州医学院神经生物研究中心,江苏徐州221004
【出 处】
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华东地区第13届实验动物科学学术交流会
论文部分内容阅读
本文构建血红素氧合酶-2(HO-2)真核表达载体pEF1 α-HO-2-AcGFP,并观察其在小鼠脑血管内皮细胞中的表达情况.利用PCR技术从C57BL/6小鼠海马组织中扩增出HO-2基因cDNA序列,用双酶切法将HO-2基因cDNA序列克隆到真核表达载体pEF1 α-IRES-AcGFP上,构建HO-2的真核表达载体pEF1 α-HO-2-AcGFP.重组载体pEF1 α-HO-2-AcGFP经EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切和测序鉴定.电转染法转染小鼠脑血管内皮细胞,实时定量PCR、Western blot方法检测HO-2在小鼠脑血管内皮细胞中RNA和蛋白质水平的表达情况.酶切鉴定和测序显示pEF1 α-HO-2-AcGFP载体构建正确;重组载体转染的小鼠脑血管内皮细胞HO-2的RNA和蛋白表达水平显著高于空载体.成功构建了HO-2的真核表达载体pEF1α-HO-2-AcGFP,为进一步研究其机制和功能奠定了基础.
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