目的:研究改变经典Wnt信号通路对PDLSCs成骨分化的影响,以及Hippo通路上下游组分的表达变化。探讨经典Wnt信号通路调控Hippo信号通路的分子机制,阐述YAP/β-catenin信号调控PDLSCs分化的分子网络。方法:培养原代牙周膜干细胞,分别用重组Wnt3a、重组DKK-1蛋白处理,激活、抑制经典Wnt信号通路,ALP染色及茜素红钙结节染色检测细胞成骨活性改变,WB、q-PCR测定成骨相关因子ALP、Col-1及Runx-2的表达情况,以及Hippo信号通路各组分的表达变化。用Co-IP方法检测经典Wnt信号通路中相关蛋白与Hippo通路核心激酶及调节因子作用位点。结果:激活经典Wnt信号通路后,ALP染色及茜素红钙结节染色检测牙周膜干细胞成骨活性增强,ALP、Col-1及Runx-2的表达上调,Hippo信号通路中转录共激活因子TAZ表达增加,而其上游Mob1、LATS1、Sav1、MST2表达降低;抑制经典Wnt信号通路后,ALP染色及茜素红钙结节染色检测牙周膜干细胞成骨活性减弱,ALP、Col-1及Runx-2的表达下调,TAZ表达降低,而其上游Mob1、LATS1、Sav1、MST2表达增加;Co-IP结果显示β-catenin与TAZ,β-catenin与Mob1产生结合效应。结论:经典Wnt信号通路与Hippo信号通路存在交互作用。激活经典Wnt信号通路正向调控牙周膜干细胞成骨分化能力,并且抑制Hippo信号通路表达;抑制经典Wnt信号通路负向调控牙周膜干细胞成骨分化能力,并促进Hippo信号通路表达。在阐述TAZ/β-catenin信号调控PDLSCs成骨分化的分子网络的基础上,寻找到Wnt信号通路与Hippo信号通路潜在新的蛋白结合位点β-catenin与Mob1,证实经典Wnt信号通路与Hippo信号通路共同调节牙周膜干细胞成骨分化。