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目的 探讨超声击破微泡造影剂这种新型的基因转染方法在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜组织中实现基因转染的可能性.方法 质粒的提取与鉴定：取大肠杆菌DH5α制备感受态细菌,将质粒pEGFP-C1转化感受态细菌,挑取单菌落接种到LB培养基中,37 ℃振荡培养过夜.提取质粒后酶切电泳鉴定.实验动物及分组：建立RA大鼠动物模型：大鼠四肢足爪均严重肿胀、踝关节直径增长幅度≥2 mm为造模成功.实验分组：分4组,每组5只(10个膝关节)：单纯质粒组、超声+质粒组、微泡+质粒组和超声+微泡+质粒组.基因转染方法：单纯质粒组：单纯向大鼠关节腔内注射10 μg质粒；超声+质粒组：先将10 μg质粒注射入大鼠关节腔内,再采用超声诊断仪持续照射10 min；微泡+质粒组：稀释后的SonoVue 300μl与10μg质粒混合之后注射入大鼠关节腔内；超声+微泡+质粒组：稀释后的SonoVue 300μl与10μg质粒混合,注射入大鼠关节腔内之后,再用Philips HDI 4000持续照射10 min.EGFP表达及定量分析(RT-PCR)：3 d后取大鼠膝关节滑膜组织,部分在荧光显微镜480 nm波长激发状态下观察EGFP转染效果.部分大鼠膝关节滑膜组织取下后,提取总RNA,进行预扩增,定量PCR仪进行扩增,实时定量PCR分析EGFP基因的表达差异.本实验数据处理使用SAS 9.0软件进行统计分析,P ＜0.05为差异有统计学意义.结果 各实验组关节滑膜组织中EGFP均有表达,但是超声+微泡+质粒组的绿色荧光强度明显增强.电泳结果中也可以看到各组中均有EGFP表达.单纯质粒组、超声+质粒组、微泡+质粒组三组之间EGFP表达水平两两比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；单纯质粒组、超声+质粒组、微泡+质粒组三组与超声+微泡+质粒组之间EGFP表达水平比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 本研究最后证实,超声击破微泡这种方法能够提高EGFP对RA大鼠关节滑膜组织的基因转染效率,为RA疾病的基因治疗提供了一种新的方法.