过表达Nanog对牙髓细胞干性及成牙本质向分化的影响

来源 :第九次全国牙体牙髓病学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lokimi
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  目的:探讨过表达Nanog对人牙髓细胞增殖性能及Oct4、Sox2和牙本质向分化标记DSPP表达的影响.方法:构建过表达Nanog的慢病毒载体质粒pSIN-EF2-Nanog-IRES-GFP-puro,采用psPAX和pMD2.G慢病毒包装系统,转入293T细胞进行病毒液的生产和收取,转染生长良好的第2代人牙髓细胞,构建稳定过表达Nanog的牙髓细胞株,以空载体转染的细胞为对照组,采用CCK8法检测细胞的增殖情况,Real-time qPCR检测Oct4、Sox2和DSPP的mRNA表达,Western blotting检测Oct4、Sox2和DSPP蛋白的变化.结果:成功构建Nanog过表达牙髓细胞株,CCK8法检测结果显示Nanog过表达组与对照组细胞增殖能力无统计学差异(P>0.05).Real-time qPCR结果可见过表达组Oct4、Sox2表达明显增多,DSPP表达降低(P<0.05).Western blotting结果与PCR变化趋势相同.结论:过表达Nanog能提高牙髓细胞转录因子Oct4、Sox2的表达,降低DSPP的表达,有助于维持细胞干性;Nanog对牙髓细胞增殖能力无明显影响.
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