鸭坦布苏病毒NS1蛋白相互作用的宿主蛋白的筛选

来源 :第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:johnchen1001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)属于黄病毒科、黄病毒属,该病毒引起坦布苏病毒病,又称产蛋下降综合症、传染性卵巢炎,是以产蛋率、采食量显著下降,出现脑炎样神经症状为特征的新型传染病.本研究利用RT-PCR技术扩增鸭坦布苏病毒XT株NS1基因,并将其克隆至载体pGBKT7,成功构建了重组质粒pGBKT7-NS1.重组质粒转染Y2H酵母,经诱饵的毒性和自激活试验说明构建的重组质粒适合酵母双杂交试验.通过酵母双杂交试验从已构建好的鸭胚成纤维细胞cDNA文库中筛选出10个阳性克隆,经测序、Blast比对最终得到3个可能与鸭坦布苏病毒的NS1蛋白发生互作的目的蛋白,为明确坦布苏病毒的致病机制及鸭坦布苏病毒的NS1蛋白在病毒传播过程中的功能奠定了基础.
其他文献
本研究目的是分析丁酸梭菌对肠炎沙门氏菌感染的肉鸡生长性能、肠道形态、沙门氏菌定植和免疫参数的影响.180只一日龄AA肉鸡随机分为三组,每组三个重复,每个重复20只肉鸡.阴性对照组为正常饲喂基础日粮;沙门氏菌处理组为正常饲喂基础日粮后感染肠炎沙门氏菌;丁酸梭菌处理组为在基础日粮中添加丁酸梭菌后感染肠炎沙门氏菌.结果表明,丁酸梭菌处理组中肉鸡的体增重和饲料转化率均高于其它组(p <0.05),除了感染
会议
自然转化是细菌水平基因转移的一种主要机制。它是指细菌主动从外界摄取游离DNA,并整合至基因组并表现相应性状的过程。前期研究发现,鸭疫里默氏杆菌能够发生自然转化,但参与该过程的相关基因及机制并不清楚。本研究通过转座子随机插入突变的方法,构建了2000株的随机突变株文库,对该文库进行筛选,获得了自然转化缺陷株25株,自然转化频率显著降低株20株。随后,通过对插入位点的序列鉴定,发现有36个基因参与自然
会议
鸭疫里默氏杆菌是引起鸭传染性浆膜炎的主要病原,给世界各国养鸭业造成了巨大损失.目前,用于鸭疫里默氏杆菌基因操作技术并不完善,延缓了对其致病机制的深入研究.在成功构建用于鸭疫里默氏杆菌基因回补穿梭质粒的基础上,本研究发现鸭疫里默氏杆菌RpsL基因突变后会对链霉素产生抗性,而在突变株中表达野生型的RpsL,突变株会变的对链霉素重新敏感.基于此现象,本试验利用RpsL作为反向筛选基因成功建立了鸭疫里默氏
会议
鸭疫里默氏杆菌属于黄杆菌科,是引起鸭传染性浆膜炎的主要病原体.由于缺乏有效的基因操作工具,所以对其致病机制研究较少.本研究首次发现,鸭疫里默氏杆菌能够吞噬外界环境中的DNA片段,并利用此现象建立了快速、有效的基因缺失方法.利用此方法获得缺失基因的频率约为10-5.与异源性的DNA相比,鸭疫里默氏杆菌更倾向于吞噬自身的DNA.鸭疫里默氏杆菌也可以吞噬环状的质粒DNA,但效率要降低很多.自然转化条件研
会议
空肠弯曲杆菌是一种在世界范围内广泛流行的重要食源性致病菌,可引起人类肠胃炎等疾病.禽类是空肠弯曲菌的主要携带者之一,污染空肠弯曲杆菌禽类制品是人类感染空肠弯曲菌的重要途径.在人类生活和畜牧养殖中抗生素的过度使用导致空肠弯曲菌的耐药率越来越高,尤其是人类治疗常用的氟喹诺酮类药物,严重威胁公共卫生安全.本研究对79株喹诺酮耐药分离株相关基因进行测序分析,发现86位突变(Thr-86-Ile)存在于所有
会议
铁离子是绝大多数微生物生存所必需的一种营养元素,包括鸭疫里默氏杆菌.前期研究工作表明,鸭疫里默氏杆菌可以利用宿主的血红素作为一种铁离子来源,且TonB1和TonB2参与到了此过程.然而,鸭疫里默氏杆菌转运血红素机制并不清楚.通过转录组测序及比较分析,发现RA0C_0783-RA0C_0784参与了此过程.RA0C_0783基因敲除后严重影响了鸭疫里默氏杆菌对血红蛋白的利用.血红素和血红蛋白结合试验
会议
本研究根据碳纳米管间距可调的特性,结合微流体芯片技术,研发了可特异性捕捉不同大小病毒粒子的诊断平台。研究表明:合成碳纳米管的铁催化剂镀层厚度与纳米管间距之间存在负相关性,通过精确控制铁镀层的厚度可使合成的碳纳米管间隙在30纳米-300纳米范围内自由调节;碳纳米管合成过程中的nitrogen doping处理可显著改善材料的生物兼容性,便于其在生物医药领域应用;整合碳纳米的微流体芯片可对不同大小的病
会议
会议
2015年8月以来,河南省部分地区养鸡场出现以发病鸡表现心包积液、肝炎为特点的肝炎-心包积液综合症.该病传播快,发病率和死亡率较高,给养殖业造成了严重的经济损失.为研究心包积液-肝炎综合征的发病特征、流行规律以及防控手段,我们对2015年8月至2017年4月期间河南农业大学动物疫病检测中心所收集的215份疑似病例进行调查统计.PCR结果发现,接诊病例中有141份为心包积液-肝炎综合征,分别来自全省