【摘 要】
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空肠弯曲杆菌是一种在世界范围内广泛流行的重要食源性致病菌,可引起人类肠胃炎等疾病.禽类是空肠弯曲菌的主要携带者之一,污染空肠弯曲杆菌禽类制品是人类感染空肠弯曲菌的重要途径.在人类生活和畜牧养殖中抗生素的过度使用导致空肠弯曲菌的耐药率越来越高,尤其是人类治疗常用的氟喹诺酮类药物,严重威胁公共卫生安全.本研究对79株喹诺酮耐药分离株相关基因进行测序分析,发现86位突变(Thr-86-Ile)存在于所有
【机 构】
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湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,畜禽细菌病防制剂创制重点实验室,湖北武汉430064
【出 处】
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第五届全国禽病分子生物技术青年工作者会议
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空肠弯曲杆菌是一种在世界范围内广泛流行的重要食源性致病菌,可引起人类肠胃炎等疾病.禽类是空肠弯曲菌的主要携带者之一,污染空肠弯曲杆菌禽类制品是人类感染空肠弯曲菌的重要途径.在人类生活和畜牧养殖中抗生素的过度使用导致空肠弯曲菌的耐药率越来越高,尤其是人类治疗常用的氟喹诺酮类药物,严重威胁公共卫生安全.本研究对79株喹诺酮耐药分离株相关基因进行测序分析,发现86位突变(Thr-86-Ile)存在于所有的喹诺酮类药物耐药菌株,与相关报道一致；gyrB基因在分离株中存在多个无义突变位点；parC基因在所有耐药分离株中均未检测到.对外排泵基因cmeABC启动子区测序比对发现,CmeR调控蛋白结合区域有12种CmeR-Box序列类型,包括点突变、点插入和点缺失.MIC试验显示,CmeR-Box发生突变的菌株的MIC值高于未突变菌株,其中点插入或者缺失的菌株最高(P＜0.05),荧光定量PCR结果显示发生CmeR-Box突变的菌株外排泵基因cmeA表达量显著高于未突变菌株(P ＜0.05),凝胶阻滞试验的结果显示rCmeR蛋白与各CmeR-Box突变类型DNA结合都有所下降,其中点插入与点缺失下降最为明显.可见CmeR-Box突变导致其与负调控蛋白CmeR的结合能力下降,使得外排泵基因cmeABC表达上调,引起空肠弯曲菌喹诺酮类药物耐药性显著提高.本研究的结果显示喹诺酮类药物耐药的空肠弯曲菌均具有已报道的促旋酶基因gyrA86位突变,同时本研究新发现了一系列CmeABC外排泵启动子区突变,其中CmeR-Box的点突变和缺失可引起了空肠弯曲菌喹诺酮类药物的高水平耐药.本研究将为解析CmeR-CmeABC外排泵系统在空肠弯曲菌氟喹诺酮类药物耐药中的作用提供理论依据.
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