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目的 观察高浓度葡萄糖、高浓度游离脂肪酸对人皮肤成纤维细胞p-catenin表达的影响.方法 复苏正常成人皮肤成纤维细胞株,高糖DMEM(25mmol/L)培养基进行培养,使细胞生长同步化.首先,噻唑蓝法(MTT)筛选葡萄糖和游离脂肪酸对成纤维细胞最佳作用浓度：取对数期生长的细胞分为：葡萄糖处理组和游离脂肪酸处理组,葡萄糖处理组含不同浓度葡萄糖(25、30、35、40、50、60、70mmol/L),对照组不加葡萄糖；游离脂肪酸处理组含不同浓度软脂酸(100、200、400、600、800、1000timol/L),对照组仅为高糖DMEM培养基.以1×104个/7L细胞接种于96.7L板中,分别用含以上浓度的葡萄糖和软脂酸及体积分数10％FBS的培养液培养24h,以MTT法检测不同培养条件下成纤维细胞吸光度值,结合细胞形态学观察,选择一个对细胞会造成一定损伤,但又不会使细胞大量死亡的浓度作为处理成纤维细胞的最佳浓度.其次,以最佳浓度培养成纤维细胞不同时间,蛋白印记法检测胞浆内p-catenin蛋白的表达.取对数生长期的细胞分为3组：①高浓度葡萄糖组(35.mmol/L),②高浓度游离脂肪酸组(200btmol/L),⑨高浓度葡萄糖糖+高浓度游离脂肪酸(35mmol/L+200mnol/L)联合组.于加入葡萄糖和软脂酸培养前(oh)以及培养后4、8、12、16、20、24、48h,收集各组细胞,采用realtimeRT-PCR和western blot法检测各组细胞p-cateninmRNA及蛋白的表达情况.结果 (1)培养24h后,成纤维细胞OD值于葡萄糖浓度35.mmol/L和游离脂肪酸200btmol/L时分别为(0.741±0.012；0.676±0.043),与对照组(0.934±0.007)相比开始下降(t值分别为1.70和2.48,P＜0.05),后随着葡萄糖和软脂酸浓度的增加,各组OD值逐渐减小(P＜0.05).(2)35mmol/L葡萄糖组、200timol/L游离脂肪酸组及二者联合培养组细胞内p-cateninmRNA及蛋白的表达分别于12h、4h和8h开始降低(t值分别为745,5.12, 3.33,P＜0.05),48h降至最低(P值均小于0.05).结论 高葡萄糖、高游离脂肪酸都能抑制成纤维细胞p-catenin的表达,高游离脂肪酸抑制作用先于高葡萄糖.短时间内,二者对p-catenin的抑制作用首先是相互拮抗,随着时间的延长,又变为相互协同.