【摘 要】
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目的:研究线粒体氧化磷酸化对牙髓干细胞早期分化的调控作用。方法:XFp细胞外流量检测能量代谢表型及功能;qPCR检测牙髓干细胞分化相关基因、线粒体相关基因的表达情况;Weste
【机 构】
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四川大学华西公共卫生学院华西第四医院口腔科; 口腔疾病研究国家重点实验室国家口腔疾病临床医学研究中心四川大学华西口腔医院预防科/牙体牙髓科;
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目的:研究线粒体氧化磷酸化对牙髓干细胞早期分化的调控作用。方法:XFp细胞外流量检测能量代谢表型及功能;qPCR检测牙髓干细胞分化相关基因、线粒体相关基因的表达情况;Western blotting及酶标仪检测糖酵解相关酶表达;氰氯苯腙阻断电子传递链抑制,研究线粒体功能对牙髓干细胞早期分化的调控作用。结果:牙髓干细胞矿化培养第3天,ALP表达增加,通过上调己糖激酶(hexokinase,HK),丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase,LDH)表达,增加基础糖酵解、糖酵解能力和糖酵解储备力来激发糖酵解途径;通过上调TFAM mRNA表达,增加线粒体基础呼吸、ATP生成及最大呼吸能力来激发线粒体氧化磷酸化功能。矿化培养第7天,通过上调TFAM mRNA表达,下调HK、PK、LDH表达来增加OCR/ECAR比值,使能量代谢表型转变为以线粒体氧化磷酸化为主的代谢模式。氰氯苯腙作用牙髓干细胞后,促进HK、PK、LDH表达,抑制TFAM及NRFs-1的表达,抑制牙髓干细胞的早期分化。结论:牙髓干细胞早期分化依赖线粒体氧化磷酸化的正向调控,其能量代谢特征为糖酵解及线粒体氧化磷酸化同时增加转变为以线粒体氧化磷酸化为主的动态变化过程。
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