【摘 要】
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利用PCR的方法,从猪链球菌2型四川资阳分离株449-1扩增出sao基因,克隆到pMD18-T载体中,构建质粒pMD18T-sao.以Sal I和BamH I从pMD18T-sao中切下目的sao基因片段并克隆到质柱p
【机 构】
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军事医学科学院军事兽医研究所,长春 130062,内蒙古民族大学生命科学学院,通辽 028000
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第三届猪病防控学术研讨会
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利用PCR的方法,从猪链球菌2型四川资阳分离株449-1扩增出sao基因,克隆到pMD18-T载体中,构建质粒pMD18T-sao.以Sal I和BamH I从pMD18T-sao中切下目的sao基因片段并克隆到质柱pMAL-p2X中,构建重组表达质粒pMALp2X-sad,转在宿主菌TBI中进行诱导表达.sao基因经序列分析表明比GenBank报道序列AY864331少了270 bp;SDS-PAGE电泳检测结果表明,重组菌株表达出了136 kD左右的目的蛋白MBP-Sao,目的蛋白为可溶表达,约占菌体蛋白总量的12.3％.表达的蛋白可用Amylose树脂层析柱纯化.将纯化的融合蛋白MBP-Sao免疫家兔,利用所得抗血清建立协同凝集试验,用于检测猪链球菌.
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