论文部分内容阅读
背景:脓毒症是由机体对感染的反应失调而引起的危及生命的器官功能障碍[1]。具有高发病率、高死亡率、治疗费用高的“三高”特点,若错失治疗时机可演变为脓毒性休克、多器官功能障碍(MODS)。因此,脓毒症的早期识别、临床诊断、病情评估及有效治疗对降低病死率至关重要。然而,当前临床常用于诊断和评估脓毒症病情的生物标志物降钙素(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、肿瘤坏死因子-a(Tumor necrosis factor-a,TNF-a)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)等对临床脓毒症早期诊断、危险分层及预后评估有限。采用连续、动态和组合生物标记物的检测手段并整合其临床特征,有助于儿童脓毒症的早识别、早诊断、早治疗。血浆游离DNA是在细胞外液中可检测的DNA片段,包含线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)及核DNA(Nuclear DNA,n DNA)。脓毒症时,两者由凋亡和坏死组织释放到循环中,其浓度的增加可能是由于细胞释放增加或清除率降低所致[2]。而mtDNA因长度短、结构简单、高拷贝数备受青睐。目前多项研究表明在成人脓毒症患者中血浆mtDNA浓度明显升高,且对于评估脓毒症病情严重程度及预后判断有重要价值,预测脓毒症死亡率具有较高的特异度和灵敏度,优于常规脓毒症检测指标,而在儿童脓毒症研究少。目的:本研究采用前瞻性研究方法观察脓毒症患儿血浆mt DNA动态变化,探索血浆mtDNA对评估脓毒症患儿病情的临床价值。方法:将2016年6月至2017年1月收住湖南省儿童医院重症监护病房的37例脓毒症患儿作为入选对象,另随机选用年龄、性别相仿的健康儿童27例为实验对照组;所有儿童均于住院第1、3、7天抽取桡静脉血,采用实时荧光定量PCR检测患儿住院后第1、3、7天血浆mtDNA水平。同时检测CRP、PCT等实验室指标。结果:(1)脓毒症与正常组对比,脓毒症组血浆mt DNA含量为(3384.4,1368.5-6857.5)pg/ml,高于正常对照组(1904.8,1267.9-2395.5)pg/ml,(Z=-2.603,P=0.00),差异有统计学意义。(2)血浆mtDNA与病情严重性(1)脓毒症多器官障碍组血浆mt DNA水平高于单器官障碍组,且前者血浆mt DNA水平在第1、3天升高明显,其中第1天mtDNA差异有显著统计学意义(P<0.001),第3天mtDNA差异有显著统计学意义(P<0.001),第7天mtDNA差异有统计学意义(P<0.025),并随着时间延长,两组血浆mtDNA水平呈逐渐下降趋势。(2)脓毒症休克组血浆mt DNA水平显著高于非休克组,且前者血浆mt DNA水平在第1、3天升高更明显。其中第1天mtDNA差异有显著统计学意义(P<0.000),第3天mtDNA差异有显著统计学意义(P<0.000),第7天mtDNA差异有显著统计学意义(P<0.003),并随着时间延长,两组血浆mtDNA水平呈逐渐下降趋势。(3)血浆mtDNA与预后脓毒症非幸存组血浆mt DNA水平显著高于幸存组,其中第1天mt DNA差异有统计学意义(P<0.016),第3天mt DNA差异有显著统计学意义(P<0.002),第7天mtDNA差异无统计学意义(P>0.05),并随着时间延长,两组血浆mtDNA水平逐渐呈下降趋势。(4)ROC曲线分析(1)mtDNA与PCT、CRP预测脓毒症MODS的诊断效能将mtDNA与PCT、CRP预测脓毒症MODS工作曲线(ROC)进行分析:以传统MODS诊断为标准,血浆mtDNA、CRP、PCT绘制ROC曲线,曲线下面积分别是:0.848、0.614、0.775,其中血浆mt DNA、PCT预测MODS有显著统计学意义(P<0.005),而CRP无统计学差异(P>0.05)。最佳截断值分别为2176.2pg/ml,7.24ng/mL,mt DNA的敏感度和特异度依次为89%、72%,CRP的敏感度和特异度依次为58%、67%,PCT的敏感度和特异度依次为84%、61%。(2)不同时间点血浆mt DNA预测脓毒症MODS的诊断效能入院第1天血浆mtDNA曲线下面积最大(P<0.05),提示准确性较高,第3、7天准确性降低。结论(1)脓毒症患儿血浆mtDNA水平升高,与器官功能损伤有关,表明其可用作儿童脓毒症MODS诊断的生物标志物之一。(2)脓毒症患儿血浆mtDNA水平在入院后第1、3天升高明显,与病情严重性呈正相关,对脓毒症病情严重程度的判断及预后评估有一定价值。