苦豆籽粕-双歧杆菌合生元的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:jerryweimao
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为开发新型饲用微生态制剂,本研究以苦豆籽粕和两歧双歧杆菌为主要实验材料,首先实验采用单因素试验和正交试验设计,对两歧双歧杆菌普通TPY培养基进行了优化选择;并分别应用平板计数进行了2%、4%、6%、8%不同浓度苦豆籽粕对三株鸡肠道菌(双歧杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌)体外生长影响的研究;应用打孔法测定了双歧杆菌对鸡白痢沙门氏菌、鸡大肠杆菌的抑菌效果;最后研究了苦豆籽粕-双歧杆菌合生元对鸡白痢沙门氏菌和鸡大肠杆菌体外生长的影响。结果表明:1.对两歧双歧杆菌普通TPY培养基的碳源、氮源进行配比优化,得出最佳增菌培养基配比为:碳源(葡萄糖︰乳糖=1︰1):3.0%、氮源(胰蛋白胨︰大豆蛋白胨=2︰1):2.5%;并用分光光度计测定菌液吸光值(OD600)绘制生长曲线,确定优化后培养基的最佳增菌时间为34h,此时活菌数可达2.1×10~9 cfu/mL。2.在培养基中添加6%浓度的苦豆籽粕对两歧双歧杆菌的体外生长有明显的促进作用,与对照组相比差异极显著(p<0.01);2%、4%、6%、8%不同浓度苦豆籽粕均对鸡白痢沙门氏菌和鸡大肠杆菌有促进作用,且呈递增关系。其中2%、4%、6%浓度苦豆籽粕对鸡白痢沙门氏菌生长的影响,与对照组相比差异显著(p<0.05);对鸡大肠杆菌生长的影响,与对照组相比差异不显著(p>0.05)。8%浓度苦豆籽粕对鸡白痢沙门氏菌生长的影响,与对照组相比差异极显著(p<0.01);对鸡大肠杆菌生长的影响,与对照组相比差异显著(p<0.05)。就6%浓度苦豆籽粕而言,对两歧双歧杆菌的促进作用远远强于对鸡白痢沙门氏菌和大肠杆菌的促进作用。6%浓度苦豆籽粕组的两歧双歧杆菌活菌数的数量级是对照组的1000倍,而鸡白痢沙门氏菌和大肠杆菌活菌数的数量级与其相应对照组相比并没有变化。表明苦豆籽粕-双歧杆菌合生元中的益生元苦豆籽粕对益生菌的促进作用要强于对有害菌群的促进作用。3.实验采用打孔法研究两歧双歧杆菌对鸡白痢沙门氏菌和鸡大肠杆菌的体外生物拮抗试验,均未表现出肉眼可见的抑菌作用;而采用混合培养法研究两歧双歧杆菌对鸡白痢沙门氏菌和鸡大肠杆菌的体外生物拮抗试验,在16h内鸡白痢沙门氏菌和鸡大肠杆菌的生长呈上升趋势,到34h时二菌的生长均表现出不同程度的抑制。4.制作液体苦豆籽粕-双歧杆菌合生元,采用混合培养的方法研究其对鸡白痢沙门氏菌、鸡大肠杆菌体外生长影响。结果表明:从1%浓度的合生元开始对鸡白痢沙门氏菌的体外生长出现抑菌,差异显著;从1.5%浓度的合生元开始对鸡大肠杆菌的体外生长出现抑菌,差异显著。以上试验表明:苦豆籽粕可以作为益生元,促进益生菌(两歧双歧杆菌)的增殖,进而发挥其合生元的协同作用,抑制致病菌(鸡白痢沙门氏菌和鸡大肠杆菌)的生长。为生产实践应用本合生元拮抗某些鸡肠道致病菌,奠定了实验依据。
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