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禽蛋在碱加工形成皮蛋的过程中,会产生大量的赖丙氨酸(LAL),而LAL的产生会降低皮蛋本身的营养价值,并对人体产生潜在的危害。目前对禽蛋碱加工过程中LAL产生的相关研究甚少,且不够系统与深入。本研究主要以碱加工的禽蛋为研究对象,建立LAL的分析方法;研究皮蛋的腌制条件和添加物对皮蛋中LAL产生的影响,并在保证皮蛋感官品质的前提下,筛选出可抑制皮蛋中LAL产生的添加物;此外,考察碱对蛋清、卵白蛋白中LAL的形成、以及氨基酸形成LAL的影响;旨在控制皮蛋加工过程中LAL的产生和初步探讨LAL的形成机制,为LAL的理论研究奠定基础。本论文的具体研究内容和结果如下:1、通过探索衍生试剂N-(特丁基二甲基硅烷基)-N-甲基三氟乙酰胺(MTBSTFA)的用量、温度和时间对LAL衍生化效率的影响,得到LAL的MTBSTFA衍生化的优化条件为:MTBSTFA用量100μL,衍生温度75℃,时间30min,建立了MTBSTFA衍生化的气相色谱分析皮蛋中LAL的方法。2、通过分别控制皮蛋腌制和后熟时间、温度、碱的种类和用量、各金属盐的添加量来制作皮蛋,结合考察成品的感官品质,用气相色谱法测定其中LAL的含量,研究皮蛋腌制条件对其中LAL产生的影响。结果表明:皮蛋中产生的LAL总体上随腌制时间的延长、温度的升高和碱用量的增加而增加,随重金属盐用量的增加先减少后增加。NaCl和KCl对皮蛋中LAL的产生基本无显著影响。在保证皮蛋感官品质正常的前提下,控制腌制条件:腌制温度为20~25℃,较短的腌制时间,4%NaOH或5%~5.5%KOH,0~8%的NaCl或KCl,0.4%的CuSO4或ZnSO4或CuSO4与ZnSO4(1∶1)混合盐配制的腌制液,可控制皮蛋中的LAL水平相对较低。3、通过在皮蛋腌制液中分别添加5~80mmol/L的还原型谷胱甘肽、L-半胱氨酸、蔗糖、D-葡萄糖、麦芽糖、L-抗坏血酸、柠檬酸、DL-苹果酸、乳酸和亚硫酸钠来制作皮蛋,并分别检查皮蛋的感官品质及成品皮蛋蛋白和蛋黄中LAL的含量,考察它们分别对皮蛋蛋白和蛋黄中LAL产生的影响,从而筛选出几种能有效抑制皮蛋中LAL产生的添加物。结果表明:5~80mmol/L的还原型谷胱甘肽、D-葡萄糖、麦芽糖、L-抗坏血酸、柠檬酸、乳酸和亚硫酸钠,以及5~10mmol/L和80mmol/L的L-半胱氨酸都对皮蛋中LAL的产生具有一定的抑制作用。其中,既能保证皮蛋应有的感官品质,又能较强地抑制LAL产生的添加物有:40~80mmol/L亚硫酸钠,40~80mmol/L D-葡萄糖,40mmol/L柠檬酸,40mmol/L L-抗坏血酸。4、通过对碱处理的蛋清和卵白蛋白展开研究,发现:碱处理蛋清中的苏氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、赖氨酸和精氨酸的含量随时间延长而减少,并形成了LAL,形成的LAL量随pH增大、温度升高而增加,随时间延长先增加后保持稳定。当碱处理条件一致时,卵白蛋白中形成的LAL量约占蛋清中LAL量的50.51%~58.68%;卵白蛋白是蛋清中参与形成LAL的主要蛋白质。碱处理对氨基酸形成LAL的研究发现:在碱作用下,游离的L-丝氨酸、L-半胱氨酸、L-胱氨酸都可与L-赖氨酸反应形成LAL,表明丝氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、赖氨酸是参与形成LAL的前体氨基酸。