目的：1.研究恰麻古多糖BRP及从中分离纯化后的中性多糖组分BRNP-1、BRNP-2及酸性多糖组分BRAP-1、BRAP-2对人肺癌A549、肝癌HepG2、胃癌AGS细胞的生长抑制的影响，筛选出具有良好抑癌作用的肿瘤细胞及抑癌有效恰麻古多糖。2.检测人肺癌细胞A549在不同剂量下恰麻古多糖BRP干预后，恰麻古多糖BRP对其凋亡作用及对凋亡相关活性氧的释放与线粒体膜电位损失的影响。3.探讨人肺癌A549细胞经不同剂量恰麻古多糖干预后，细胞内凋亡相关基因蛋白Bcl-2、Bax、caspase-9、caspase-3及p53表达水平的调控。4.研究恰麻古各组多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫调节作用的影响。
　　方法：1.通过CCK-8细胞增殖/毒性检测试剂盒测定恰麻古多糖分别干预人肺癌A549、肝癌HepG2、胃癌AGS细胞24h、48h后,对各癌细胞增殖/抑制的影响，并筛选出抑制肿瘤增殖的有效恰麻古多糖成分以及抑制作用最为明显的癌细胞。2.经流式细胞技术检测恰麻古多糖对肺癌细胞A549的凋亡作用及相关指标活性氧与线粒体膜电位损失的影响。3.采用实时荧光定量PCR技术实时动态监测恰麻古多糖对人肺癌细胞A549凋亡相关基因Bcl-2、Bax、caspase-9、caspase-3、p53表达水平的调控。采用蛋白印迹法western blot考察恰麻古多糖对人肺癌细胞A549凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3、p53表达水平的影响。4.通过CCK-8细胞毒性试剂盒检测恰麻古多糖对小鼠巨噬细胞增殖率的影响以及通过中性红法、Griess NO试剂盒与ELISA试剂盒检测免疫相关吞噬活性、NO释放水平与细胞因子TNF-α、IL-6分泌水平的影响。
　　结果：1.根据CCK-8试剂盒测定恰麻古各组多糖对肺癌A549、肝癌HepG2、胃癌AGS细胞作用24h、48h后的抑制率，与空白对照组相比，恰麻古多糖BRP对人肺癌细胞A549具有较好的抑制作用，并呈剂量依赖性；而BRNP-1、BRNP-2、BRAP-1、BRAP-2对肺癌细胞A549无抑制作用或抑制作用不明显。2.经流式细胞技术检测结果可知，恰麻古多糖BRP能够引起人肺癌细胞A549凋亡，且在高剂量时，BRP对肺癌细胞A549的凋亡率最高，并与正常对照组相比，具有显著性差异（P＜0.05）；恰麻古多糖BRP可刺激肺癌细胞A549释放活性氧，并影响胞内线粒体膜电位损失较正常对照组升高，且具有显著性差异（P＜0.05）。3.实时荧光定量PCR检测结果表明，不同剂量恰麻古多糖BRP对肺癌细胞A549干预24h后，抗凋亡基因Bcl-2表达水平明显降低，而凋亡基因Bax、caspase-9、caspase-3和抗癌基因p53表达水平显著升高，并与正常对照组具有显著性差异（P＜0.05）；蛋白印迹法western blot法实验结果与RT-PCR结果一致，在不同剂量恰麻古多糖BRP刺激下的肺癌细胞A549，可引起胞内抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平降低，促凋亡蛋白Bax、caspase-3和抗癌蛋白p53表达水平显著升高。4.通过CCK-8试剂盒测定结果可知，不同剂量的恰麻古多糖BRP、中性多糖BRNP-1、BRNP-2及酸性多糖BRAP-1、BRAP-2对小鼠巨噬细胞RAW264.7具有增殖作用，并呈剂量依赖性；此外，恰麻古各组多糖可不同程度使RAW264.7吞噬活性增强，提高其释放NO、TNF-α与IL-6水平，从而达到免疫调节作用。
　　结论：1.恰麻古多糖BRP对人肺癌细胞A549生长具有良好的抑制作用。2.恰麻古多糖BRP抑制肺癌细胞A549是诱导细胞凋亡实现的，而引起凋亡是通过多糖刺激细胞线粒体释放过量活性氧，引起线粒体膜电位损失引起膜通透性改变而发生的。3.恰麻古多糖BRP刺激肺癌细胞A549，上调细胞内促凋亡基因蛋白Bax、caspase-3、p53的表达水平，下调抗凋亡基因蛋白Bcl-2表达水平，最终使细胞发生凋亡，达到抗肿瘤目的。4.恰麻古各组多糖对小鼠巨噬细胞RAW264.7具有增殖活性，并可加强巨噬细胞吞噬活性，促进细胞释放NO、分泌细胞因子TNF-α与IL-6，从而调节小鼠巨噬细胞RAW264.7免疫活性。