成年起病的白质脑病伴轴索球样变和胶质细胞色素沉着（adult-onset leukoencephalopathy with axonal spheroids and pigmented glia,ALSP）是一种遗传性进行性的罕见神经退行性疾病,临床主要表现为执行功能障碍、记忆能力衰减、人格改变、运动障碍和癫痫等,迄今尚无有效治疗措施。目前已有多篇文献研究指出集落刺激因子 1 受体（colony stimulating factor 1 receptor,CSF1R）是ALSP的致病基因。CSF1R在中枢神经系统中高表达于小胶质细胞上,但是,CSF1R如何引起ALSP疾病发生,其机制尚未阐明。在本研究中,我们采用CRISPR/Cas9技术构建Csf1r+/-（heterozygous,HE）小鼠以模拟临床ALSP疾病表型,通过将HE小鼠雌雄交配,获取原代分离培养Csf1r+/+（wildtype,WT）、HE、Csf1r-/-（homozygous,HO）三种基因型小胶质细胞,以小胶质细胞特异性标记蛋白Iba1和活化吞噬标记蛋白CD68免疫荧光双标染色,观察到HE小胶质细胞普遍呈现激活状态;这一现象在HE小鼠中进一步得到证实,即HE小鼠脑中小胶质细胞亦较其同窝对照WT小鼠呈现显著激活状态。动物行为学实验表明,HE小鼠于6月龄即出现运动、认知、情绪及嗅觉等方面的异常。米诺环素（Minocycline,Mino）是一种四环素类广谱抗生素,能有效抑制小胶质细胞活化,在多种神经退行性疾病模型中发挥有效的抗炎、抗凋亡和神经保护作用。那么Mino能否通过抑制HE小鼠小胶质细胞的活化而达到治疗目的呢?因而,我们首先用0.02 μM Mino分别处理WT和HE小胶质细胞0、6、12、24小时,观察了 Mino对两种基因型小胶质细胞的影响,通过小胶质细胞特异性标记蛋白Iba1和活化吞噬标记蛋白CD68免疫荧光共定位实验,我们发现Mino可以有效抑制HE小胶质细胞的活化。我们进一步通过实时定量荧光PCR（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）实验观察促炎因子Tnf-α、Il-1β的转录水平表达,发现HE小胶质细胞Tnf-α和Il-1β的转录水平表达较同窝对照WT小胶质细胞显著上调,用Mino药物处理可以有效降低HE小胶质细胞Tnf-α、Il-1β的转录水平表达,说明Mino可以有效改善HE小胶质细胞促炎因子的释放。接着以50 mg/kg/d剂量腹腔注射（intraperitoneal injection,i.p.）小胶质细胞活化抑制剂Mino干预治疗WT和HE小鼠一个月,通过Iba1和CD68免疫荧光双标实验和实时定量荧光PCR实验,发现Mino在体内水平中也可有效抑制HE小鼠小胶质细胞的活化,降低促炎因子Tnf-α和Il-1β的表达。综上,Mino在体内外水平中均可有效抑制HE小鼠小胶质细胞的活化,降低炎症水平。接下来,通过磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）技术发现HE小鼠侧脑室增大和胼胝体变薄的情况,而在Mino干预治疗后可以有效抑制HE小鼠的这种影像学改变;采用透射电子显微镜（transmission electron microscope,TEM）观察到Mino可以显著改善HE小鼠髓鞘丢失以及突触密度减少等病理表型。最后,我们探究了 Mino药物干预治疗后对HE小鼠行为学的影响。通过平衡木实验观察发现Mino可以有效降低HE小鼠通过平衡木的时间及打滑次数,说明Mino可以有效改善HE小鼠运动能力方面的缺陷;通过T迷宫实验观察发现Mino可以有效减少HE小鼠在转换臂内的转换次数百分比,说明Mino可以有效改善HE小鼠工作记忆能力;接下来通过旷场和黑白箱实验观察发现Mino可以明显增加HE小鼠在明亮处以及白箱中停滞的时间,说明Mino可以有效改善HE小鼠的焦虑情绪;通过糖水实验观察也发现经Mino干预治疗后,HE小鼠对糖水的偏好量增多,说明Mino同样可以改善HE小鼠的抑郁行为;通过埋藏食物实验观察发现用Mino干预治疗后,HE小鼠找到埋藏食物的时间减少,说明HE小鼠嗅觉方面的缺陷也得到改善。综上,我们发现,HE小鼠在运动、认知、情绪及嗅觉方面均有缺陷,采用Mino腹腔注射一个月进行药物干预治疗后,HE小鼠在运动、认知、情绪及嗅觉等方面的缺陷均显著改善。综上所述,我们的研究结果表明,CRISPR/Cas9技术构建的HE小鼠可以模拟临床ALSP疾病表型,该模型中小胶质细胞呈现出与人类ALSP疾病类似的小胶质细胞活化情况,用小胶质细胞抑制剂米诺环素处理,可以显著改善HE小鼠的运动能力、学习记忆、抑郁、焦虑及嗅觉等方面的缺陷。本研究将为ALSP疾病的治疗提供新的方案,亦为临床上老药新用提示新的方向。