鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）是一种重要的水禽致病菌,主要感染雏鸭、火鸡、鹅等多种禽类,可引起败血症,剖检可见纤维素性心包炎、肝周炎、脑膜炎等,感染后发病率、死亡率高,给养殖业带来了巨大的经济损失。研究发现细菌的Ⅸ型分泌系统（T9SS）效应分子的生物学功能具有多样性,它们参与细菌自身的生命活动或与细菌的致病性密切相关。最近研究发现RA存在T9SS,在前期研究中我们发现RA的T9SS组分基因突变株Yb2ΔgldK和Yb2ΔgldM的毒力与野生株Yb2相比显著降低,且其分泌蛋白中有9个T9SS效应分子与野生株Yb2差异表达。这些效应分子大多具有酶活性,可能参与RA的生命活动或与其致病性相关,其中包括效应分子Endonuclease Ⅰ（EndoI）。本研究中,我们对效应分子EndoI的突变株Yb2ΔendoI和回复株cYb2ΔendoI的生物学特性进行了探究。生长曲线的测定结果表明,EndoI对RA各个时期的生长繁殖没有影响。在毒力试验中,雏鸭感染后12、24、36、48h的血液中突变株Yb2ΔendoI的菌量均显著低于野生株Yb2,表明效应分子EndoI与RA毒力有关。在黏附入侵试验中,突变株Yb2ΔendoI黏附和入侵鸭胚成纤维细胞的能力均显著低于野生株Yb2和回复株cYb2ΔendoI,说明EndoI对 RA黏附和入侵细胞至关重要。细胞因子检测结果显示,突变株Yb2ΔendoI刺激HD-11细胞产生IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α的能力与野生株Yb2和回复株cYb2ΔendoI相比显著降低,表明EndoI在RA刺激细胞产生炎症反应的过程中发挥重要作用。在前期的研究中,效应分子EndoI被预测具有核酸酶活性。本试验构建了原核表达的重组EndoI蛋白（rEndoI）,并验证其具有脱氧核糖核酸酶和核糖核酸酶活性,能够切割噬菌体DNA和单链RNA。随后对rEndoI的酶活特性进行了研究,结果表明rEndoI切割DNA的最佳pH为7.5,最佳温度为55-60℃。rEndoI的脱氧核糖核酸酶活性依赖二价金属离子,反应体系中存在7.5 mM Mg2+时其活性最佳,Mn2+和Ca2+对其脱氧核糖核酸酶活性具有一定促进作用。此外,rEndoI还具有核糖核酸酶活性,能切割单链RNA且不依赖二价金属离子,在Mg2+、Mn2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+存在时表现出不同程度的核糖核酸酶活性。研究还发现RNA的存在会竞争性抑制rEndoI对DNA的切割。经预测,效应分子EndoI的氨基酸序列中E111、H112、N140三个氨基酸残基是其关键活性位点。这些结果表明RA的endoI基因编码的T9SS效应分子EndoI具有核酸酶活性且在细菌毒力中发挥重要作用。