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目的:地皮菜（Nostoc commune）是一种蓝藻,由于其营养丰富全面,常用于疾病的预防和治疗,近年来其提取物已被证明对肠道疾病有效。例如,地皮菜中分离的多糖对偶氮甲烷（Azomethane,AOM）和葡聚糖硫酸钠（Dextran Sulfate Sodium,DSS）诱导的小鼠结肠炎相关结肠肿瘤的发生具有保护作用。并且在我们的前期研究中,已经发现地皮菜的主要活性成分对羟基苯甲醛（P-Hydroxybenzaldehyde,HD）可以显著改善DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）的肠道炎症反应和粘膜损伤。然而,我们尚不知道HD抗UC是通过原型还是其代谢物,以及其抗UC的作用靶点仍是未知的。本研究从体内外两方面探究HD及其代谢物对UC的改善作用,旨在明确HD的起效方式并阐明其可能的分子机制,为其开发成治疗UC的新药奠定基础。方法:第一部分:（1）为了确定HD是否通过代谢起效,HD通过不同给药方式作用于UC小鼠,每天给药一次。结肠炎是小鼠通过饮用7天含有2.5%的DSS水和3天的常规饮水来诱导。实验过程中,每天记录小鼠体重、腹泻和大便出血情况。第10天,收集它们的结肠并测量长度。使用苏木精和伊红染色（Hematoxylin and Eosin,H＆E）观察结肠组织的病理情况;使用髓过氧化物酶（Myeloperoxidase,MPO）试剂盒检测结肠组织MPO的活性;使用高效液相色谱（High performance liquid chromatography,HPLC）考察HD是否在肠道内代谢成对羟基苯甲酸（p-Hydroxybenzoic acid,HA）。以上研究目的是确定HD是否在体内发生代谢以及其代谢物的化学结构。（2）随后,为了探究HA是否是HD的活性代谢物,我们对HD和HA进行药效比较。体内:分别使用HA（10、20、40 mg/kg）、HD（40 mg/kg）和美沙拉嗪（Mesalazine,200 mg/kg）灌胃给予UC小鼠,每种药物每天给药一次。之后处理同前一致。使用H＆E观察结肠组织的病理情况;使用MPO试剂盒检测结肠组织MPO的活性;使用定量实时聚合酶链锁反应（Quantitative real time polymerase chain reaction,q RT-PCR）和酶联免疫吸附（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）方法检测小鼠结肠组织中白介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）、白介素-6（Interleukin-6,IL-6）和肿瘤坏死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α）的m RNA和蛋白质表达水平;使用蛋白质印迹法（Western blot,WB）和q RT-PCR方法检测小鼠结肠组织中E-cadherin和occludin的蛋白质和m RNA表达水平,以及雌激素受体β（Estrogen receptorβ,ERβ）的蛋白表达水平。体外:体外上皮屏障功能障碍模型通过使用TNF-α（10 ng/m L）诱导Caco-2细胞建立。MTT法用于检测不同浓度HA和TNF-α（10 ng/m L）对Caco-2细胞活力的影响;将筛选出的HA浓度（3、10和30μM）与TNF-α（10 ng/m L）联合处理Caco-2细胞,同时以Mesalazine（10μM）作为阳性对照组。通过q RT-PCR、ELISA方法检测细胞和细胞培养基中IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白质和m RNA表达水平;通过WB、q RT-PCR和免疫荧光（Immunofluorescence,IF）等方法检测细胞中E-cadherin和occludin的蛋白质和m RNA表达水平,以及ERβ的蛋白表达水平。第二部分:为了明确ERβ是HA改善结肠炎肠道炎症反应和肠黏膜损伤的关键靶点。体内:分别使用HA（40 mg/kg）、PHTPP（1 mg/kg i.p.）和HA（40 mg/kg）+PHTPP（1 mg/kg i.p.）处理UC小鼠,每种药物每天给药一次。之后的步骤同第一部分一致。使用H＆E观察结肠组织的病理情况;使用MPO试剂盒检测结肠组织MPO的活性;使用q RT-PCR和ELISA方法检测小鼠组织中IL-6和TNF-α的m RNA和蛋白质表达水平;使用WB和q RT-PCR方法检测小鼠结肠组织中E-cadherin和occludin的蛋白质和m RNA表达水平。体外:分别使用TNF-α（10 ng/m L）+HA（30μM）、TNF-α（10 ng/m L）+PHTPP（0.1μM）、TNF-α（10 ng/m L）+HA（30μM）+PHTPP（0.1μM）处理Caco-2细胞24 h。通过ELISA和q RT-PCR方法检测细胞和细胞培养基中IL-6和TNF-α的蛋白质和m RNA表达水平;通过WB、q RT-PCR和IF方法检测细胞中E-cadherin和occludin的蛋白质和m RNA表达水平。结果:（1）HD（40 mg/kg i.g.）对DSS诱导的小鼠结肠炎的疾病症状具有改善作用,具体表现为HD口服给药显著缓解小鼠体重减轻、降低DAI评分、阻止结肠缩短,降低结肠MPO活性和改善UC小鼠结肠病理。然而,腹腔注射给予HD对结肠炎小鼠的疾病症状并无改善作用。（2）HD口服给药后在肠道内可以代谢成HA。（3）口服给药情况下,HA对DSS诱导的小鼠结肠炎的疾病症状具有改善作用,并且缓解UC小鼠结肠疾病症状的效果优于HD。（4）单独给予HA或者HA联合TNF-α处理下不影响Caco-2细胞生存活力。（5）HA在体内外实验均显著抑制肠道炎症反应和改善肠粘膜损伤,具体表现为抑制促炎因子（IL-6和TNF-α）的表达、上调紧密连接蛋白（E-cadherin和occludin）和ERβ的表达,且呈剂量或浓度依赖方式,但其对IL-1β的表达不影响。（6）体内外实验表明,阻断ERβ会逆转HA缓解肠炎小鼠的疾病症状、抑制肠道炎症反应和修复肠粘膜损伤的作用。结论:研究表明,HA是HD抗UC的活性代谢物,其通过激活ERβ抑制炎症反应和改善肠粘膜损伤,从而发挥抗结肠炎作用。