【摘 要】
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树突状细胞(dendritic cells, DC)在抗原提呈方面起重要作用。DC 分化发育过程分为成熟阶段与不成熟阶段,未成熟的 DC 具有摄取处理抗原的能力,一旦发育为成熟的 DC,抗原捕获
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树突状细胞(dendritic cells, DC)在抗原提呈方面起重要作用。DC 分化发育过程分为成熟阶段与不成熟阶段,未成熟的 DC 具有摄取处理抗原的能力,一旦发育为成熟的 DC,抗原捕获能力减弱,却变成刺激静息 T 淋巴细胞,激活初次免疫应答的抗原提呈细胞(antigenpresenting cells, APC)。增强肿瘤抗原的免疫原性并且使其易于为DC 等 APC 捕获提呈的方法是肿瘤疫苗研究的重要领域,是新肿瘤疫苗研究的基础。 目的:观察比较榄香烯复合瘤苗(EC-TCV)、丝裂霉素(MMC)处理(凋亡肿瘤细胞达 42%)或反复冻融(导致细胞坏死)的肿瘤细胞体外冲激的小鼠骨髓来源 DC 的表型、IL-2 和 IL-12 的分泌、对肿瘤细胞 HCa-F的杀伤作用。 方法:无菌取小鼠股骨,用 PBS 冲洗髓腔,用含有小鼠重组的 GM-CSF和 IL-4(浓度为 10ng/ml)的 1640 全培基培养,诱导扩增 DC。第六天收集不贴壁细胞,然后用 EC-TCV、凋亡的肿瘤细胞、坏死的肿瘤细胞分别刺激 DC 24 小时,收集 DC 及培养上清,用流式细胞仪检测 DC 的表型变化,ELISA 法测培养上清中 IL-12 的浓度。用 MTT 法检测不同冲激的DC 刺激的脾脏 T 淋巴细胞的增殖活性,测 3 天和 5 天培养上清中 IL-2的含量及对 HCA-F 的杀伤活性。用倒置显微镜观察 DC 形态学变化。 结果: 1.不同冲激的 DC 表型变化:CD40 细胞百分率:单纯 DC 组为 69.27% +±1.07%,EC-TCV 组为 91.55%±1.65%,凋亡组为 85.93%±0.13%,坏
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