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目的：探讨CD40/CD40L信号通路对哮喘大鼠淋巴液和血液中CD4+CD25+Foxp3+Treg的增殖分化及其分泌抑制性细胞因子TGF-p1.IL-10的影响。方法：建立大鼠哮喘模型,末次激发后0h收集大鼠淋巴液及血液并检测CD4+CD25+Foxp3+Treg的百分率,并将末次激发后0h、12h、24h收集的哮喘大鼠血液和淋巴液中分离的单个核细胞(MNC)接种于24孔板内,加入抗CD40L单克隆抗体进行阻断,作用72h后采用流式细胞仪检测体外培养系中CD4+CD25+Foxp3+Treg的百分率,激光共聚焦检测CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞表面PE-CY5-Foxp3的平均光密度,酶联免疫吸附法检测培养上清中TGF-β1、IL-10的含量。结果：1.成功复制大鼠哮喘模型,并建立淋巴液引流模式。2.哮喘大鼠淋巴液和血液中CD4+CD25+Foxp3+Treg百分率显著低于正常对照组(P<0.05)；且各组淋巴液中CD4+CD25+Foxp3+Treg的百分率均显著高于血液(P<0.05)。3.末次激发后各组淋巴液来源MNC和血液来源MNC体外培养体系中CD4+CD25+Foxp3+Treg百分率随细胞收集时间距末次激发时间的延长呈先升高后降低的趋势：且各组淋巴液来源的MNC体外培养体系中CD4+CD25+Foxp3+Treg的百分率均显著高于血液(P<0.05)；哮喘组体外培养体系中淋巴液来源MNC和血液来源MNC体外培养体系中CD4+CD25+Foxp3+Treg百分率均显著低于正常对照组和抗CD40LMAb组(P<0.05)。4.哮喘激发后0h分离出的淋巴液来源MNC和血液来源MNC分别经过体外培养72h后,抗CD40L单克隆抗体(Anti-CD40LMAb)组培养的细胞中CD4+CD25+Foxp3+Treg表面PE-CY5-Foxp3的平均光密度(AOD)显著高于哮喘组(P<0.05)。5.末次激发后各时间点收集的各组大鼠淋巴液来源MNC和血液来源MNC体外培养体系的培养上清中IL-10的水平随收集时间距离末次激发时间的延长呈升高趋势；抗CD40LMAb组大鼠淋巴液来源MNC体外培养体系培养上清中IL-10的水平高于哮喘组和正常对照组,且在24h时间点差异显著(P<0.05),哮喘组和正常对照组间无显著差异；血液来源MNC体外培养体系培养上清中IL-10水平各组间无显著差异。6.0h时间点收集的哮喘组大鼠淋巴液来源MNC体外培养体系的培养上清中TGF-β1的水平显著高于抗CD40LMAb组和正常对照组(P<0.05),抗CD40LMAb组和正常对照组间无显著性差异；0h、12h时间点收集的抗CD40LMAb组大鼠血液来源MNC体外培养体系培养上清中TGF-β1的水平显著高于哮喘组和正常对照组(P<0.05),哮喘组和正常对照组无显著性差异。结论：1.、哮喘大鼠体内存在严重的CD4+CD25+Foxp3+Treg数量不足；在末次激发后不同时间点收集到的淋巴液来源MNC和血液来源MNC体外培养体系中CD4+CD25+Fox3+Treg百分率随收集时间点距末次激发时间的延长呈先升高后降低的趋势。2、用抗CD40LMAb阻断CD40/CD40L通路可促进哮喘大鼠淋巴液来源MNC和血液来源MNC体外培养体系中CD4+CD25+Foxp3+Treg的增殖。3、用抗CD40LMAb阻断CD40/CD40L通路可以促进哮喘激发后早期(0h、12h)淋巴液来源MNC体外培养体系中CD4+CD25+Foxp3+Treg分泌TGF-β1的水平,同时可以促进哮喘激发后期(24h)血液来源MNC体外培养体系中CD4+CD25+Foxp3+Treg分泌IL-10的水平。