ADSCs移植对小鼠哮喘模型的治疗作用及对ILC2s的影响

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目的:探讨脂肪源性间充质干细胞(ADSCs)移植,对哮喘的治疗作用及对2型固有淋巴细胞的影响。方法:取4周龄C57BL/6小鼠腹股沟白色脂肪组织分离、培养并鉴定ADSCs;以卵清蛋白制备哮喘模型并鉴定。40只野生型C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、细胞对照组、哮喘模型组、细胞治疗组。细胞对照组、细胞治疗组通过尾静脉注射1×10~5 ADSCs,末次激发24h后取小鼠肺组织进行HE染色及荧光染色观察GFP+-ADSCs在肺组织的分布;肺泡灌洗液(BALF)进行脱落细胞计数,检测血清及BALF上清液OVA-Ig E表达;以酶消化法将肺组织制备成单细胞悬液,采用流式细胞术检测各组小鼠肺组织中ILC2s的比例;采用q RT-PCR法检测肺组织中IL-5、IL-13、GATA3、ST2和ICOS-L的表达水平,了解ADSCs移植对哮喘小鼠气道炎症的作用及对ILC2s的影响。结果:通过尾静脉注射的GFP+-ADSCs向肺组织趋化。肺组织病理学提示,哮喘模型组小鼠支气管周围及周围肺组织有明显的炎症细胞浸润;细胞治疗组支气管周围炎症细胞浸润减轻。血清及BALF上清液中OVA-Ig E的表达,哮喘模型组较对照组升高,细胞治疗组明显低于哮喘模型组。流式细胞学检测哮喘小鼠肺组织中ILC2s,哮喘模型组ILC2s数量较两对照组明显升高,细胞治疗组较哮喘模型组下降。2型细胞因子表达,哮喘模型组IL-5、IL-13的表达明显高于两对照组,细胞治疗组显著低于哮喘模型组。ILC2s细胞功能基因表达,哮喘模型组GATA3及ST2、ICOS-L表达明显上调,而细胞治疗组明显下降。结论:ILC2s活化是支气管哮喘的重要发病机制。ADSCs移植可以抑制支气管炎症,减少肺组织中ILC2s的数量,抑制ILC2s功能,发挥治疗支气管哮喘的作用。
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