草莓对DMBA诱导的地鼠口腔癌模型的化学预防作用研究

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大量流行病学研究发现富含新鲜水果蔬菜的饮食能减少一些包括癌症在内的慢性病的发病率,这些蔬果中的健康促进成分主要来自于其内所含的植物化学成分和生物活性成分。在草莓中最丰富的植物化学成分是鞣花酸,同时含有一些类黄酮类物质,比如花青素、儿茶酚和栎精等。已经有实验证明了以上成分在肿瘤发生发展方面有化学预防活性。利用DMBA诱导的金黄色地鼠实验性口腔癌模型,通过肉眼和病理检查观察草莓对诱癌和促癌阶段的化学预防作用。通过对组织标本的细胞增殖、血管生成生物标志物的检测探讨草莓的作用机制。通过观察在DMBA诱导口腔癌不同阶段给予冻干草莓粉对口腔癌的预防和治疗效果,来评价草莓对口腔癌的化学预防作用,从而为天然食品草莓作为肿瘤化学预防剂的开发利用提供科学依据。   研究对象为170只雄性金黄叙利亚地鼠,体重90-130g,取10只为阴性对照组不作任何处理;余下160只随机甲均分为四组:阳性对照组、6周5%冻干草莓实验组(6wk STRAW)、18周5%冻干草莓实验组(18wk STRAW)及24周5%冻干草莓实验组(24wk STRAW)。除阴性对照组外,其余用0.5%DMBA石蜡油溶液涂于地鼠左侧颊囊,每周3次,连续涂6周。6wk STRAW在实验第1至6周DMBA处理的同时给予5%冻干草莓粉饲料。18wk STRAW在DMBA处理6周后从第7周开始给予5%冻干草莓粉饲料。24wk STRAW在DMBA处理前、处理过程中和处理后都给予含5%冻干草莓粉饲料。   为了保证实验中草莓质量的一致性,在同一时间采摘同一培养条件下的具有相似成熟度的草莓,在采摘后的2-4小时内进行清洗、-20℃冷冻保存,最后进行冻干化处理,以最大限度的保存草莓中的有效成分。   所有实验动物均在第24周末处死,取左侧颊囊一半组织置于福尔马林中固定进行组织病理学观察、BrdU和VEGF免疫组化染色,另一半置于液氮中,并于-80℃冷冻保存。   与阳性对照组相比:   (1)肉眼肿瘤发生率:6wk STRAW由97.1%降低为94.3%(P>0.05)、18wkSTRAW的由97.1%降低为72.4%(P<0.05)、24wk STRAW实验组97.1%降低为72.7%(P<0.05);   (2)平均瘤数目:6wk STRAW由2.45±1.65降至2.06±1.26(P>0.05)、18wkSTRAW由2.45±1.65降至1.26±1.12(P<0.05)、24wk STRAW由2.45±1.65降至1.42±1.12(P<0.05);   (3)平均瘤体积:6wk STRAW由2.11±10.82cm3下降为0.48±2.42cm3(P>0.05)、18wk STRAW由2.11±10.82cm3降至0.41±11.27cm3(P>0.05)、24wkSTRAW由2.11±10.82cm3降至0.37±1.33cm3(P<0.05);   (4)镜下肿瘤发生率及病灶数:6wk STRAW,18wk STRAW和24wk STRAW三个草莓实验组的口腔癌发生率较阳性对照组略有降低,但未见统计学差异(P>0.05)。所有草莓实验组均显著降低了异常增生及鳞癌的病灶数(P<0.05);   (5)BrdU增殖指数:在单纯增生中,24wk STRAW由17.3±2.16%降低至6.44±3.47(P<0.05);在异常增生中,18wk STRAW由23.63±3.73%降低至11.26±1.63%(P<0.05)、24wk STRAW由23.63±3.73%降低至9.01±3.02%(P<0.05);在鳞癌中,24wk STRAW由26.53±3.14%降至10.4±1.75%(P<0.05);   (6)微血管密度:6wk STRAW由11.4±2.86降至6.77±1.28(P<0.01)、18wkSTRAW降至5.25±0.76(P<0.01)、24wk STRAW降至5.65±1.22(P<0.01)。   本研究结果表明,5%冻干草莓粉膳食对DMBA诱导的地鼠口腔癌的发生发展过程有一定的抑制作用,其机制可能与抑制细胞增殖及微血管的形成有关。当5%冻干草莓粉膳食应用于口腔癌从启动到发展的整个过程或促进发展阶段时,其化学预防作用最显著,由此说明草莓可作为口腔癌的化学预防药物来源之一。
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