花生四烯酸(ARA)对黄鳝生长及保肝机制的研究

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花生四烯酸(ARA)是很多生命活性物质的前体,在生物体起着非常重要的作用。黄鳝是我国重要的特种水产经济动物,现已大规模进行人工养殖。养殖黄鳝的过程中,常产生“吃得越多,长得越快,死得也越快”现象,表现为“脂肪肝”或称“肝胆综合症”。本课题组在前期研究中发现ARA对黄鳝具有一定保肝作用,为进一步了解ARA对黄鳝保肝现象及其机制,更为合理配制黄鳝饲料提供参考依据,本文从四个方面进行了研究,结果如下:1.饲料中添加不同比例的ARA对黄鳝生长性能的影响。通过配制含ARA比例为0.00%(对照组),0.35%,0.70%,1.05%,1.40%和1.75%的配合饲料,饲喂幼鳝30d。结果:ARA可促进幼鳝的生长和提高幼鳝成活率,综合分析得出饲料中ARA适宜添加比例为0.70%。2.饲料中添加0.70%ARA对黄鳝生长、生理、生化指标的影响。通过在基础饲料中添加0.7%ARA,对照组不添加ARA。测定黄鳝生长、肌肉营养成分、肝功能和脂肪代谢等指标。结果:添加ARA可以促进黄鳝生长,降低肌肉水分含量,增加肌肉蛋白和脂肪含量;降低黄鳝肝体指数和内脏指数;增加肝组织中谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性;降低血清总胆固醇和增加高密度脂蛋白含量。结果表明:添加ARA能增强黄鳝肝功能和提高脂肪代谢能力、降低蛋白质作为能量消耗、促进蛋白合成,从而提高黄鳝的生长性能。3.ARA对肝损伤黄鳝保肝作用机制。通过对饲喂了含ARA饲料的试验组黄鳝与饲喂未含ARA的对照组黄鳝,同时注射CCl4肝损伤剂,观察黄鳝肝脏显微结构的变化,测定黄鳝血清生化指标及分析ARA代谢途径中相关基因表达情况。结果:显微结构显示试验组黄鳝肝细胞完整性及其细胞内膜结构比对照组更完整,肝脏细胞受损比例比对照组少,细胞损伤的程度低,同时损伤的肝组织修复的时间较短。试验组黄鳝血清中谷丙转氨酶(GPT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性显著高于对照组,而谷草转氨酶(GOT)活性均显著低于对照组;丙二醛(MDA)含量显著低于对照组。磷脂酶A2(PLA2)、环氧合酶-1(COX-1)、环氧合酶-2(COX-2)在损伤后6、12、24h显著高表达,48h恢复正常水平与对照组差异不显著。而5-脂氧合酶(5-LOX)、12-脂氧合酶(12-LOX)和细胞色素(CYP1A)均显著高于对照组。结果表明:ARA对黄鳝保肝机制,在于能通过维持SOD高活性,增强清除脂质过氧化产物,提高黄鳝的抗氧化功能,维护肝细胞膜的完整性,减少肝细胞损伤,使黄鳝具有较强抗应激能力。通过COX-1、COX-2代谢途径产生炎症因子,减少细胞的损伤,同时通过5-LOX、12-LOX和CYP1A途径促进有毒有害物质排出,加快损伤细胞的修复速度,更快速恢复肝功能。4.饲料中添加蚯蚓对黄鳝生长性能的影响。为寻找利用蚯蚓的作为ARA来源的应用方法。分别用添加0%、25%、50%、75%、100%鲜蚯蚓的饲料饲喂黄鳝61d。结果:与对照组比较添加25%蚯蚓的饲料组增重率、特定生长率最大差异显著;添加50%蚯蚓的饲料组肥满度最大差异显著。依据生长和肥满度回归分析结果表明,添加35%蚯蚓可获得最佳生产性能。
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