基于HOXA10和SUMO化修饰探讨补肾活血汤改善子宫内膜异位症内膜容受性的机制研究

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目的:1.建立子宫内膜异位症小鼠模型;2.分组给药后免疫组化法检测各组小鼠在位内膜组织蛋白HOXA10、SUMO1的表达,免疫共沉淀法检测HOXA10-SUMO1表达量,分析结果,探讨补肾活血汤是否主要通过影响HOXA10的SUMO1修饰从而改善子宫内膜异位症内膜容受性。方法:第一部分查阅相关文献研究并综述。第二部分1.筛选阴道涂片提示有规律动情周期的小鼠;2.腹腔注射法建立BALB/c小鼠子宫内膜异位症模型;3.分别于造模第7天、21天各随机选取5只模型小鼠验证造模成功率;4.造模21天后将小鼠随机分成中药组、模型对照组、假手术组;5.分组后给药,中药组予中剂量补肾活血汤,模型对照组和假手术组均予等体积蒸馏水,每天同一时间灌胃,共30天;6.灌胃结束后分别取各组小鼠双侧子宫,一侧放入组织固定液保存,另一侧放于-80℃冰冻保存;7.免疫组化法检测各组小鼠在位内膜组织中蛋白HOXA10、SUMO1的表达,免疫共沉淀法检测HOXA10-SUMO1表达量;8.统计学分析补肾活血汤是否主要通过影响蛋白HOXA10、SUMO1的表达,改善HOXA10的SUMO1修饰,从而改善子宫内膜异位症内膜容受性。结果:1.腹腔注射法建立小鼠子宫内膜异位症模型的成功率为100%;2.免疫组化结果显示,补肾活血汤组与假手术组内膜HOXA10表达量无明显差异(P>0.05),模型对照组内膜HOXA10表达量明显降低(P<0.01),补肾活血汤组与模型对照组内膜SUMO1蛋白表达量均异常升高,模型对照组升高更显著(P<0.01)。免疫共沉淀结果显示补肾活血汤组HOXA10-SUMO1结合蛋白明显低于模型对照组。3.补肾活血汤组HOXA10与SUMO1蛋白表达量成中等强度正相关(P<0.01)。结论:1.子宫内膜异位症模型小鼠在位内膜HOXA10的蛋白表达明显降低,SUMO1蛋白表达异常升高,提示SUMO1修饰可能也参与EMT疾病过程。2.补肾活血汤可明显上调内异症模型小鼠在位内膜HOXA10蛋白表达,亦可下调SUMO1蛋白表达,且可降低HOXA10与SUMO1蛋白的结合量,推测补肾活血汤可能通过抑制HOXA10的SUMO1修饰从而改善内异症内膜容受性。
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